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猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程血清為何要稀釋

時(shí)間:2020/11/17閱讀:1912
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  猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒都有相應(yīng)的說(shuō)明,并且每個(gè)說(shuō)明將包括樣品的稀釋份額和稀釋劑。那么我們?yōu)槭裁葱枰獙?duì)ELISA測(cè)試血清樣品進(jìn)行稀釋?這篇文章講給你答案。
  為了減少非特異性反應(yīng),可以充分反映特異性抗原-抗體反應(yīng)??捎闷胀≒BS稀釋血清,并添加1%BSA,可有效降低ELISA背景。當(dāng)然,如果太麻煩,可以用鹽水代替。無(wú)論使用直接使用還是直接使用,都必須事先確定血清的稀釋倍數(shù),但不必太小。您可以進(jìn)行初步實(shí)驗(yàn),并選擇OD為1.0左右的稀釋因子,即ELISA中的陰性孔。OD為1.0,因此以這種方式繪制的曲線很敏感。
 

猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒

  在猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中稀釋血清的過(guò)程:
  1.將蛋白質(zhì)稀釋一定倍數(shù),例如10倍或20倍稀釋(這可以大致確定一個(gè)參數(shù)),并進(jìn)行一系列稀釋以包被抗原Micro反應(yīng)板。
  2.用一定稀釋度的陽(yáng)性參考猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒血清和陰性參考血清孵育并洗滌,然后加入酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng),孵育并洗滌后,加入底物溶液顯色,停止反應(yīng)并分別測(cè)量OD值,選擇OD≥1.0的抗原稀釋液作為合適的包被濃度。通常,始終選擇略大于1.0的O.D值,而不選擇小于1.0的抗原濃度。

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