ELISA生物學(xué)測(cè)試是一種實(shí)驗(yàn)診斷方法，具有高靈敏度，特異性強(qiáng)和重現(xiàn)性好的特點(diǎn)。由于其試劑穩(wěn)定，易于保存，易于操作且結(jié)果判斷更加客觀，因此已廣泛用于免疫學(xué)檢測(cè)的各個(gè)領(lǐng)域。兔子催乳素（PRL）ELISA試劑盒適用于在人血清或血漿中對(duì)人戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體進(jìn)行體外定性檢測(cè)。
在實(shí)驗(yàn)中，樣品制備也很重要。操作不良可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如何準(zhǔn)備樣品？接下來(lái)，我們就向你介紹兔子催乳素（PRL）ELISA試劑盒樣品的制備方法。
1.細(xì)胞培養(yǎng)物上清液
?、賹⑴囵B(yǎng)基移至離心管，4℃，1,500rpm離心10分鐘；
②立即進(jìn)行上清液的分裝（血清）并在-80℃下保存樣品，盡可能減少反復(fù)凍融次數(shù)。
2.細(xì)胞提取物
?、賹⒔M織培養(yǎng)板放置在冰上；
?、谖雠囵B(yǎng)基并用預(yù)冷PBS輕輕洗滌細(xì)胞一次；
?、畚鯬BS，加入100mm培養(yǎng)板加入0.5ml*提取緩沖液；
?、苁占?xì)胞至在傾斜板中，然后移至經(jīng)過(guò)預(yù)冷的離心管中；
⑤短暫渦旋后在冰上孵育15-30分鐘；
?、拊?℃下13,000xrpm離心10分鐘，沉淀不溶性?xún)?nèi)容物；
?、邔⑸锨逡海ㄟ@里是指可溶性細(xì)胞提取物）分裝至預(yù)冷的離心管中，并于-80℃保存，盡可能減少反復(fù)凍融次數(shù)。
3.條件培養(yǎng)基
?、賹⒓?xì)胞接種到*（含血清）生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，使細(xì)胞增殖達(dá)到一定的融合率；
②棄去培養(yǎng)基，數(shù)毫升預(yù)熱PBS小心洗滌，重復(fù)洗滌步驟；
?、蹢壢BS洗滌液并小心加入無(wú)血清培養(yǎng)基；
?、芊跤?-2天；
?、輰⑴囵B(yǎng)基移至離心管，4℃1,500rpm離心10分鐘；
?、蘖⒓捶盅b上清液（血清）并在-80℃下保存樣品，盡可能減少反復(fù)凍融次數(shù)。
4.乳汁
?、偈占瘶悠凡⒃?℃下以10,000xg離心2分鐘；
?、诜盅b上清液并在-80℃下保存樣品，盡可能減少反復(fù)凍融次數(shù)。
5.血漿
①將全血收集到含抗凝劑的管中，例如BD抗凝真空采血管或添加0.1M檸檬酸鈉至1/10終體積；
?、?℃3,000rpm離心10分鐘；
③立即分裝上清液（血漿）并在-80℃下保存樣品，盡可能減少反復(fù)凍融次數(shù)。
6.尿液
?、偈占瘶悠凡⒃?℃下以10,000xg離心2分鐘；
②等分上清液（血清）并在-80℃下保存樣品，盡可能減少凍融循環(huán)次數(shù)。
7.唾液
?、偈占瘶悠凡⒃?℃下以10,000xg離心2分鐘；
?、诹⒓捶盅b上清液（血漿）并在-80℃下保存樣品，盡可能減少反復(fù)凍融次數(shù)。
8.血清
?、賹⑷占轿唇?jīng)處理的測(cè)試管中，或者到不含抗凝劑的管中，如BD血清用真空采血管；
②在室溫下連續(xù)孵育20分鐘；
③4℃3,000rpm離心10分鐘；
④立即分裝上清液（血漿）并在-80℃下保存樣品，盡可能減少反復(fù)凍融次數(shù)。
9.兔子催乳素（PRL）ELISA試劑盒組織提取物
?、儆酶蓛舻墓ぞ呓馄式M織，best好在冰上、盡快進(jìn)行，以防止被蛋白酶降解；
?、趯⒔M織置于圓底的微量離心管中，并浸入液氮中進(jìn)行“速凍”，將樣品保存在-80℃下以便后續(xù)使用或放置在冰上進(jìn)行直接勻漿；
?、蹖?duì)于約5mg的組織片，可向管中添加約300μl*提取緩沖液（查看細(xì)胞/組織提取緩沖液配方），然后用電動(dòng)勻漿器勻漿；
④清洗刀片兩次，每次清洗使用300μl*提取緩沖液，然后在4℃下維持恒定攪拌2小時(shí)（例如置于冷室中的回旋振蕩器上）；
?、?℃13,000xrpm離心20分鐘。置于冰上，將上清液（這里是指可溶的蛋白質(zhì)提取物）分裝至新、預(yù)冷的管中并在-80℃下保存樣品。盡可能減少反復(fù)凍融次數(shù)。
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