光是一種電磁波,具有一定的波長和頻率。可見光的波長范圍在400~760nm，紫外光為200~400nm，紅外光為760~500000nm。可見光因波長不同呈現(xiàn)不同顏色，這些波長在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)不同顏色的光稱單色光。太陽或鎢絲等發(fā)出的白光是復(fù)合光，是各種單色光的混合光。利用棱鏡可將白光分成按波長順序排列的各種單色光，即紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫等，這就是光譜。有色物質(zhì)溶液可選擇性地吸收一部分可見光的能量而呈現(xiàn)不同顏色，而某些無色物質(zhì)能特征性地選擇紫外光或紅外光的能量。物質(zhì)吸收由光源發(fā)出的某些波長的光可形成吸收光譜，由于物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)不同，對光的吸收能力不同，因此每種物質(zhì)都有特定的吸收光譜，而且在一定條件下其吸收程度與該物質(zhì)的濃度成正比，分光光度法就是利用物質(zhì)的這種吸收特征對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的方法。
分光光度計就是利用分光光度法，通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。不同種類的分光光度計的基本原理相似，都是利用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源。光源透過測試的樣品后，部分光源被吸收，通過測量樣品的吸光值，經(jīng)過計算可以轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計有哪幾種不同的分類方式：
1.分光光度計按照波長及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為：(1)可見光分光光度計：測定波長范圍為400～760 nm的可見光區(qū);(2)紫外分光光度計：測定波長范圍為200～400nm的紫外光區(qū);(3)紅外分光光度計：測定波長范圍為大于760nm的紅外光區(qū);(4)熒光分光光度計：用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜;(5)原子吸收分光光度計：光源發(fā)出被測的特征光譜輻射，被經(jīng)過原子化器后的樣品蒸氣中的待測元素基態(tài)原子所吸收，通過測定特征輻射被吸收的大小，來求出被測元素的含量。
2.分光光度計按自動化程度分類：可分為手動、半自動、自動分光光度計。
3.分光光度計按軟件可分為：帶掃描、不帶掃描。
