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名稱 Super Tube細胞(狗腎細胞)
別稱 MDCK supertube; SuperTube
種屬 狗
年齡(性別) 雌;成年
組織來源 正常腎
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述 從表觀正常的成年雌性可卡犬中建立了細胞株MDCK,從中克隆建立了狗上皮樣細胞株Super Tube細胞。當維持高細胞濃度時,Super Tube細胞形成大量的小管(據報道,24孔板的每孔鋪7×10^5細胞,3天內就能形成小管)。要形成小管,Super Tube細胞需要每天兩次換液以提供足夠養(yǎng)分。與原始細胞株相比,Super Tube細胞的c-AMP的檢測水平低得多,在毛喉素刺激下讀出的腺苷環(huán)化酶水平也低;Super Tube細胞的跨上皮抗性也比Super Dome和MDCK都低。
Super Tube細胞(狗腎細胞)生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 DMEM/F12(PM150312)+0.05mM NEAA+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件 凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃
保藏機構 ATCC; CRL-2285
細流式檢測細胞凋亡的數據分析方法:
1) 選中所有顆粒,將FSC和SSC設置成對數坐標軸模式備用;
2) 將橫軸和縱軸分別設成Annexin通道和PI通道(7-AAD與此類似),選取雙陰細胞群;
3) 在雙陰細胞門中,將橫軸和縱軸分別設成FCS和SSC,將數據呈現方式改為輪廓圖,找到細胞碎片,劃出碎片門,應用于所有細胞;
4) 在所有細胞中,反選碎片門,得到所有細胞;
5) 將橫軸和縱軸分別設成Annexin通道和PI通道,參照未經藥物處理的對照組,劃出十字門,確定不同群細胞的比例。
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