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RIPA裂解液(強(qiáng))WB配套產(chǎn)品

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產(chǎn)品型號

品牌ZCIBIO茁彩生物

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地上海

更新時間:2024-06-17 09:38:57瀏覽次數(shù):376次

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RIPA裂解液(強(qiáng))WB配套產(chǎn)品
裂解細(xì)胞提取總蛋白質(zhì),主要用于Western,免疫沉淀。—20℃,12個月

RIPA裂解液(強(qiáng))WB配套產(chǎn)品

1.裂解細(xì)胞提取總蛋白質(zhì),主要用于Western,免疫沉淀。
2.主要由NP-40、脫氧膽酸鈉、磷酸鈉、SDS、EDTA、蛋白酶抑制劑等。含有一支1.5ml PMSF。用本裂解液得到的蛋白樣品,可以用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑,不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
3.—20℃,12個月

使用方法:

  對于組織樣品:

  1.組織塊用冷PBS洗滌,去除血污。剪成小塊置于勻漿器中。

  2.加入10倍組織體積本試劑(使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑)使用高速組織研磨儀*勻漿。

  3.將勻漿液轉(zhuǎn)移至1.5mL離心管中,振蕩。冰浴30 min,期間用移液器反復(fù)吹打,確保細(xì)胞*裂解。

  4.12000g離心5 min,收集上清,即為總蛋白溶液。

  對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:

  1.對于貼壁細(xì)胞:

  (1)用PBS沖洗細(xì)胞2-3次。后一次*吸干殘留液。

  (2)加入適當(dāng)體積的本試劑(使用前數(shù)分內(nèi)加入蛋白酶抑制劑)于培養(yǎng)板、瓶內(nèi)3-5 min。期間反復(fù)晃動培養(yǎng)板、瓶,使試劑與細(xì)胞充分接觸。

  (3)用細(xì)胞刮刀將細(xì)胞及試劑刮下,收集到1.5mL離心管中。

  2.對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,每6孔板細(xì)胞加約250 μL本試劑(在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑),振蕩。

  3.冰浴30 min,期間每10 min用200 μL移液器反復(fù)吹打數(shù)次,確保細(xì)胞*裂解。

  4.12000g離心5 min,收集上清,即為總蛋白。

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