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PASM 六胺銀染色
實(shí)驗(yàn)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：
項(xiàng)目編號 | 項(xiàng)目名稱 | 單價(jià) | 備注 |
ZC1063 | PASM 六胺銀染色 | 張 | 55元 |
實(shí)驗(yàn)流程：
1、石蠟切片脫蠟至水。
2、重鉻酸鉀溶液浸泡過夜（需用重鉻酸鉀溶液浸泡過夜否則細(xì)胞核極易著黑色影響觀察）。
3、水洗2min
4、1%的高碘酸氧化15~20min（此時(shí)配制工作液，并將工作液放置56℃烤箱預(yù)熱）
5、流水沖洗5min，再用蒸餾水洗2次
6、切片用阻水筆畫圈，滴加預(yù)熱的工作液，放入濕盒中加蓋（濕盒中要加入少量水，防止染液在長時(shí)間加熱時(shí)蒸發(fā)變干）
7、40分鐘后要將切片拿出在鏡下觀察（觀察時(shí)工作液不用洗去）腎臟則以腎小球毛細(xì)血管基膜出現(xiàn)黑色為準(zhǔn)，如果著色不夠深，則繼續(xù)放入烤箱孵育；肺則以真菌變?yōu)楹谏珵闇?zhǔn)（有的肺組織無真菌，則以同組有真菌的肺做參考，如果都沒有真菌則以支氣管變黑為標(biāo)準(zhǔn)）。以后每隔10分鐘取出切片在鏡下觀察，直至染色結(jié)果滿意為止。
8、蒸餾水稍洗
9、5%的處理5min
10、伊紅復(fù)染(在HE染色中的伊紅后面脫水的第一缸中染伊紅為佳，伊紅復(fù)染不用染太深）直接在伊紅后面的酒精脫水，透明，封片。
結(jié)果判讀：
腎小球囊基膜、腎毛細(xì)血管球基膜和腎小管上皮基膜呈黑色。真菌、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維也呈灰黑色或棕黑色。
注意事項(xiàng)：
1、六銨銀儲(chǔ)備液配妥后應(yīng)置于4℃的冰箱內(nèi)，一般可以保存6個(gè)月，如果室溫僅可保存2周。六銨銀工作液僅能使用一次；
2、腎基膜比真菌等較難顯色，因而在60℃溫箱中作用的時(shí)間也較長；腎小管基膜一般比腎毛細(xì)血管球基膜顯色早，但應(yīng)以后者作為標(biāo)準(zhǔn)，腎毛細(xì)血管球基膜呈黑色而背景呈淡棕黃色為宜；
3、在低倍鏡檢時(shí)，菌體不宜著色太黑，否則在高倍鏡下觀察則不夠清皙透亮，在菌體密集成堆的地方顯色更要適當(dāng)；
4、切片入六胺銀染色之前必須用蒸餾水浸泡洗滌，不能用自來水，否則易出現(xiàn)沉淀。染色好用滴染法好控制染色并且要求較低，如果用浸染法所有與試劑接觸的玻璃缸必須用蒸餾水清洗干凈。另外浸染法需要的試劑較多而且玻片在顯影液中及易出現(xiàn)銀鏡反應(yīng)使整個(gè)玻片變黑很臟影響美觀并且不易控制顯色。
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