目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>乙醛酸循環(huán)系列>> 異檸檬酸裂解酶（ICL)測試盒紫外分光光度法
| 貨號 | BK-01S6598 |
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：異檸檬酸裂解酶（ICL)測試盒紫外分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
檢測方法：紫外分光光度法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6598
產(chǎn)品分類：乙醛酸循環(huán)系列
商品介紹：
測定意義: ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中，油料作物種子在萌發(fā)過程中，通過乙醛酸循環(huán)及其他過程將脂肪轉(zhuǎn)變成碳水化合物。ICL是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一。 測定原理： ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD，NADH在340nm下有特征吸收峰，監(jiān)測340nm吸光度的減小速率可間接反應(yīng)ICL活性。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
250mg 鏈霉蛋白 E Pronase E 4℃保存
50T 細(xì)小病毒B19 PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
10 g Nicotinamide （Sirt1抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Factor Xa Protease Digestion Buffer Factor Xa Protease Digestion Buffer 常溫保存
50mL 即用型封堵液（NC專用） Southern Blocking Buffer (NC) -20℃保存
2 ug pIRES-neo2 pIRES-neo2 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
姬姆薩染色液 5ml*4
1瓶 LNcap cloneFGC（GFP）細(xì)胞株 LNcap cloneFGC（GFP） 低溫運(yùn)輸和保存
營養(yǎng)瓊脂（NA） Nutrient Agar 250g
150U 半乳糖氧化 Galactose Oxidase -20℃保存
含225ml生理鹽水均質(zhì)袋 Physiological Saline 10個(gè)/包
異檸檬酸裂解酶（ICL)測試盒紫外分光光度法C16orf48 16號染色體開放閱讀框48抗體 規(guī)格: 0.2mlFBXL3 FBXL3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
HDAC8 組蛋白去乙?；?抗體 規(guī)格: 0.2mlJMJD1B 組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移JMJD1B抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD21/EBV receptor 2型補(bǔ)體受體抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-MEK1/2(Ser222) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgM/APC APC標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1mlTIF1 beta/KAP1/TRIM28 轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 規(guī)格: 0.1ml
5-HT 5-羥色胺抗體 0.1mlBZW2 BZW2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Met(Tyr1349) 磷酸化肝細(xì)胞生因子受體(原基因)抗體 規(guī)格: 0.1mlDystrophin/DMD 肌營養(yǎng)不良蛋白 規(guī)格: 0.1ml
LSAMP 大腦邊緣系統(tǒng)相關(guān)膜蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mleIF3F 真核翻譯起始因子3F抗體 規(guī)格: 0.1ml
UBL7 泛素樣蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2mlGTPBP10/Claudin12 緊密連接蛋白12抗體 規(guī)格: 0.2ml
LRCH3 富含亮重復(fù)家庭蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2mlHtrA2/Omi 線粒體絲蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
JMY 連接介導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-human IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 2ml
JAK2 蛋白質(zhì)酪激JAK2抗體 規(guī)格: 0.1mlSDH/Sorbitol Dehydrogenase 脫抗體 規(guī)格: 0.1ml
ST14/MTSP1 絲蛋白14/膜型絲蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlTRAF3/CD40bp 瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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