雞傳染性支氣管炎病毒IgG抗體Elisa檢測試劑盒

【產(chǎn)品簡介】

傳染性支氣管炎是由傳染性支氣管炎病毒引起雞的一種急性、高度接觸傳染性呼吸道傳染病，本病呈世界性分布，是嚴重危害養(yǎng)禽業(yè)的zui主要疫病之一。該試劑可以檢測非免疫雞只是否感染野毒或評價疫苗免疫后的免疫效果。

【使用意義】

①本產(chǎn)品用于雞血清抗體的檢測，以確定被檢雞是否感染過雞傳染性支氣管炎病毒或免疫雞體內(nèi)抗體水平。

②評估雞群感染IBV的風險程度。

③了解雛雞母源抗體水平，為IBV免疫程序的制定提供參考。

【檢測原理】

本品系由包被傳染性支氣管炎病毒N蛋白抗原的微孔板和酶標記抗雞IgG及其他試劑組成，應用酶免間接法原理（ELISA）檢測雞血清或血漿中傳染性支氣管炎病毒IgG抗體。

【試劑盒組成】

【使用方法】

1. 使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。
2. 取所需用量包被微孔板條，設(shè)空白、陰性及陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3. 陰性、陽性對照孔分別加陰性、陽性對照血清100μl；空白對照孔不加；樣品稀釋，血清每孔樣本先1：50稀釋后加100μl；蛋黃以1:100稀釋后每孔加100ul。
4. 混勻，置37℃溫浴30分鐘。
5. 扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。
6. 每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。
7. 置37℃溫浴30分鐘。
8. 洗滌，同步驟5。
9. 每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。

10. 每孔加終止液50μl，混勻，置酶標儀450nm處測各孔A值（建議用雙波長450nm、630nm）。

【結(jié)果判定】

1. 陰性對照：正常情況下，陰性對照孔A值≤0.1；
2. 陽性對照：正常情況下，陽性對照孔A值≥0.4；
3. 結(jié)果判定：

3.1 未曾免疫

臨界值（C.O.）的計算：臨界值=0.15+陰性對照孔均值；檢測標本A₄₅₀值≥臨界值判定為本試驗陽性；檢測標本A₄₅₀值＜臨界值判定為陰性。所有陰性、陽性對照和樣品的A值均須減去空白平均值后作為計算值；陰性對照孔A值大于0.10時應舍棄，如所有陰性對照孔A值都大于0.10時須重復實驗；陰性對照孔低于0.05時以0.05計算。

3.2 免疫雞群

免疫雞群：監(jiān)測并記錄樣本當時的抗體水平，根據(jù)結(jié)果分析抗體水平的分布及雞群免疫狀態(tài)的動向

【注意事項】

1. 操作時必須戴手套，穿工作衣，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。
2. 試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
3. 樣品稀釋液應用加液器加注，并經(jīng)常校對其準確性。
4. 洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
5. 所有樣品洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
6. 微孔板從冷藏環(huán)境中取出時應在室溫中平衡至潮氣干盡后方可，未用完的微孔板須放入有干燥劑的密封袋中保存。
7. 用于檢測的樣品應保持新鮮。
8. 剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
9. 不同批號試劑組分不得混用。

【保存與有效期】

于2～8℃避光保存，有效期自成品檢定合格之日起為12個月。