雞CCAAT增強子結(jié)合蛋白ε C/EBPε ELISA試劑盒
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一、ELISA實驗通用規(guī)則

1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。

2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。

3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。

4、實驗時,要使底物避光保存。

5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

7、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。

8、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。

9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。

10、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。

11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

12、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。

13、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。

14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。

15、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。

16、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。

17、應(yīng)盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。

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