HPCE512系統(tǒng)基于多點(diǎn)檢測(cè)，克服了常規(guī)毛細(xì)管電泳（CE）存在的問(wèn)題。與其它毛細(xì)管電泳系統(tǒng)相比，該儀器在定量、分辨率、靈敏度和重復(fù)性等方面均有較大的提高。這一顯著優(yōu)勢(shì)是通過(guò)比競(jìng)爭(zhēng)系統(tǒng)收集更多的樣本數(shù)據(jù), 然后使用專(zhuān)用的信號(hào)處理算法來(lái)區(qū)分與分析物相關(guān)的信號(hào)和來(lái)自于背景的噪聲。

詳細(xì)介紹

HPCE512

---展示毛細(xì)管電泳的非凡潛力

高效毛細(xì)管電泳的重大進(jìn)步

傳統(tǒng)CE系統(tǒng)的數(shù)據(jù)質(zhì)量往往很差。即使是相同的樣本，數(shù)據(jù)的重復(fù)性也很難達(dá)到要求。靈敏度被認(rèn)為是不夠的，除非使用昂貴的、費(fèi)時(shí)的標(biāo)記技術(shù)，這些技術(shù)會(huì)對(duì)分析物的性質(zhì)產(chǎn)生不利的影響。HPCE512作為一種免標(biāo)記系統(tǒng)，既可以減少分析成本，又可以解決常規(guī)CE的問(wèn)題。

HPCE512以每秒10到15次的速度對(duì)512像素光電二極管陣列上的每個(gè)分析物帶進(jìn)行成像，因此，每個(gè)分子帶(在這個(gè)例子中是蛋白質(zhì))的傳輸在時(shí)間和距離上可以被追蹤。

追蹤分析物的直線(xiàn)斜率取決于分子的特性（例如分子量、所選操作模式的電荷/質(zhì)量）

直線(xiàn)度表示分離條件的保真度，所有不同蛋白質(zhì)的軌跡可回到一個(gè)共同的注射點(diǎn)或頂點(diǎn)。

軟件可以識(shí)別出與任何頂點(diǎn)軌跡不一致（紅色顯示）的信號(hào)，并將其作為背景噪聲丟棄。

結(jié)果可以在背景干擾非常小的情況下對(duì)規(guī)定的峰進(jìn)行明確地分析。

這種處理方式不需要使用標(biāo)記化學(xué)品，可實(shí)現(xiàn)高分辨率、可量化和可重復(fù)的分析。

更好的數(shù)據(jù)結(jié)果分辨率、重復(fù)性和定量準(zhǔn)確度

在HPCE512系統(tǒng)中使用的512像素光電二極管陣列檢測(cè)器，可以通過(guò)每次分析捕獲更大的數(shù)據(jù)量。

強(qiáng)大的信號(hào)處理算法可消除背景噪聲，使得每個(gè)組分都可以得到分離和量化。

氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(Sigma A 6407)的EVA處理數(shù)據(jù)

高分辨率數(shù)據(jù)

案例—核糖核酸酶B及其5種糖型分析

圖像顯示了這種糖蛋白的毛細(xì)管凝膠電泳，分辨率＜200Da（1 甘露糖=162Da），得到的數(shù)據(jù)結(jié)果可與一些形式的質(zhì)譜結(jié)果相媲美。

強(qiáng)大的數(shù)據(jù)處理算法可在小于200 道爾頓的分辨率下分析糖蛋白。

自診斷功能連續(xù)監(jiān)測(cè)毛細(xì)管和緩沖液條件

電滲流問(wèn)題

熔融石英毛細(xì)管的表面存在硅羥基，這些硅羥基在常見(jiàn)電泳介質(zhì)的存在下被離子化并在見(jiàn)的pH條件下帶上負(fù)電荷，從而形成雙電層，該雙電層即使在電場(chǎng)和具有大量陽(yáng)離子的可移動(dòng)區(qū)域的影響下也不會(huì)移動(dòng)。在這個(gè)致密層之外，是一個(gè)中性電解液的擴(kuò)散層。

當(dāng)電位差作用于毛細(xì)管時(shí)，可移動(dòng)層中的陽(yáng)離子向陰極方向遷移。離子在電解質(zhì)中被溶劑化，因此大量電解質(zhì)緩沖液也向陰極方向移動(dòng)。這種流體的流動(dòng)被稱(chēng)為電滲流（EOF），如果不通過(guò)多點(diǎn)檢測(cè)進(jìn)行監(jiān)控并通過(guò)毛細(xì)管調(diào)節(jié)進(jìn)行控制，則會(huì)導(dǎo)致數(shù)據(jù)質(zhì)量下降，尤其是數(shù)據(jù)的重復(fù)性不好。

HPCE方法

多點(diǎn)檢測(cè)允許在其信號(hào)處理算法中將基于空間和距離的數(shù)據(jù)集生成為等相位圖。然后可以將其用于每次運(yùn)行的檢查中，以查看毛細(xì)管中的條件是否已影響數(shù)據(jù)。通過(guò)觀(guān)察等相位圖中分析物譜帶或緩沖液成分的行為，可以監(jiān)控任何特定分離中的EOF。這樣可以?xún)?yōu)化毛細(xì)管條件和其他參數(shù)（例如pH值、溫度、緩沖液等），從而在可重復(fù)性，分離度和定量方面產(chǎn)生明顯優(yōu)異的數(shù)據(jù)。