豬繁殖與呼吸綜合癥病毒(PRRSV),俗稱豬藍耳病毒不僅可以垂直傳播,也可水平傳播,是威脅養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的主要傳染病之一。此病的仔豬發(fā)病率可達到100%,死亡率可達到50%以上,母豬流產(chǎn)率可達到30%以上。藍耳病的祖先不在我國,藍耳病是1987年在美國報道的,在美國發(fā)現(xiàn)至今有近20年時間,但在美國沒有發(fā)現(xiàn)"高致病性藍耳病變異病毒"如此猖獗,卻在我國"引進"短短十年時間就變成"高致病性藍耳病變異病毒",并泛濫26個省份。尤其是2006年發(fā)生于我國大江南北的,由高致病性豬藍耳病引起的高熱性疾病,更是使我們對生物安全的重視敲響了警鐘。因此,研究和建立一種快捷、準確、敏感的檢測方法對檢疫該病具有重要意義。
本品系由包被豬藍耳疫病毒抗原的微孔板和酶標記抗豬IgG及其他試劑組成,應(yīng)用酶免間接法原理(ELISA)檢測豬血清或血漿中豬藍耳病毒 IgG抗體。實驗時,加入稀釋的對照血清和待檢血清,經(jīng)溫育后,若樣品中含有豬藍耳病毒的特異性抗體,則將與檢測板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標二抗,與檢測板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍色產(chǎn)物,加入終止液反應(yīng)后,用酶標儀450nm波長測定各反應(yīng)孔中的OD值
【使用意義】
豬藍耳ELISA診斷試劑盒用于檢測豬血清中豬藍耳病毒抗體。評估豬場豬藍耳苗免疫狀況,感染豬的血清學診斷。
【試劑盒組成】
1. | 豬藍耳病毒抗原包被微孔板條 | 96T×2 |
2. | 酶標記物 | 22ml×1 |
3. | 樣品稀釋液 | 50ml×1 |
4. | 洗滌液(用前1:20稀釋) | 40 ml×1 |
5. | 顯色劑A | 7 ml×2 |
6. | 顯色劑B | 7 ml×2 |
7. | 終止液 | 7 ml×2 |
8. | 豬藍耳病毒抗體陽性對照血清(已滅活) | 1 ml×1 |
9. | 豬藍耳病毒抗體陰性對照血清(已滅活) | 1 ml×1 |
10. | 說明書 | 1份 |
【規(guī)格】192頭份/盒
【樣品制備】
取動物全血,按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血?!窘Y(jié)果判定】
1. 陰性對照:正常情況下,陰性對照孔A值≤0.15;
2. 陽性對照:正常情況下,陽性對照孔A值≥0.5;
3. 結(jié)果判定:樣品A450值大于0.38,判為陽性;樣品A450值在0.2到0.38之間,判為可疑;樣品A450值小于0.2,判為陰性。
【試驗方法的局限性】
該試驗僅作為定性檢測豬藍耳病毒IgG抗體。