人血管生成素-1（ANG-1） ELISA Kit

　　ELISA試劑盒說明：
　　1．檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
　　2．中、英文說明書可能會有不*之處，請以英文說明書為準。
　　3．剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
　　4．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。
　　5．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
　　該Elisa試劑盒可檢測樣本：血液標本，組織液標本，尿液標本，糞便標本，腦脊液標本，胸腹水標本等（具體詳細情況請咨詢）
　　Elisa試劑盒操作步驟（具體操作以說明書為準）：
　　實驗開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
　　1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。
　　為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
　　2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加*標記抗體工作液100μl（取1μl*標記抗體加99μl*標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
　　3.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
　　4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同*標記抗體工作液）100μl，37℃，60分鐘。
　　5.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
　　6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
　　7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
　　8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
　　注：
　　1.用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
　　2.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
　　3.為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜。
　　4.未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、*標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、*標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
　　5.建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。
　　自備物品
　　1.酶標儀（建議參考儀器使用說明提前預熱）
　　2.微量加液器及吸頭，EP管
　　3.蒸餾水或去離子水，全新濾紙
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