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上海珂淮儀器有限公司
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BL698A熒光定量PCR試劑盒(5X1mL)

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-16 09:37:25瀏覽次數(shù):2170次

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Biosharp BL698A熒光定量PCR試劑盒(5X1mL),是采用 SYBR Green I 嵌合熒光法進行Real Time PCR的試劑,將熱啟動Taq DNA聚合酶、dNTP、SYBR Green I等試劑預(yù)混成即用的2x Mix,可對目標cDNA進行快速并具有高特異性的定量檢測。

Biosharp BL698A熒光定量PCR試劑盒(5X1mL)

廠家介紹:

Biosharp BL698A 熒光定量PCR試劑盒(SYBR Green qPCR Mix)

品牌:biosharp

貨號:BL698A

規(guī)格:5X1mL

本產(chǎn)品是采用 SYBR Green I 嵌合熒光法進行Real Time PCR的試劑,將熱啟動Taq DNA聚合酶、dNTPSYBR Green I等試劑預(yù)混成即用的2x Mix,可對目標cDNA進行快速并具有高特異性的定量檢測。本產(chǎn)品采用化學(xué)修飾的Hot Start Taq DNA聚合酶,在 50 ℃以下無活性,只有 95 ℃條件下加熱后才能*恢復(fù)酶的活力,Z大限度減少非特異性擴增產(chǎn)物的產(chǎn)生,提高熒光定量PCR反應(yīng)的精確性。該試劑盒*的反應(yīng)緩沖液,可在寬范圍中得到良好的擴增結(jié)果、檢測靈敏度更高、信號更強。

產(chǎn)品組分:

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

1

2×SYBR Green qPCR Mix

5 x 1ml

2

50×ROX Reference Dye

1ml

保存條件

收到本產(chǎn)品后,請立即置于-20℃避光保存,一年有效,28℃條件下儲存6個月,避免反復(fù)多次凍融。

使用說明

一、配制 Real-Time PCR反應(yīng)體系:

1、將所有試劑2×SYBR Green qPCR Mix,ROX Reference Dye,模板,引物和RNase-Free ddH2O,在室溫下融解并*混勻,避免產(chǎn)生氣泡。短暫離心后,置于冰上按照下表配制反應(yīng)液。

參考下表配制反應(yīng)體系:

組分

20ul體系

終濃度

SYBR Green qPCR Mix

10μl

Primer F (10 μM)*

0.4~0.8 μl

0.2~0.4 uM*

Primer R (10 μM)*

0.4~0.8 μl

0.2~0.4 uM*

50 x ROX Reference Dye**

cDNA模板

--

RNase-Free ddH2O

20 μl

一般來說反應(yīng)體系中引物終濃度為0.2 uM即可得到較好的擴增效果。當(dāng)反應(yīng)性能比較差時,可以在終濃度0.2~0.4 uM范圍內(nèi)調(diào)整引物濃度。

** 幾種常見儀器的Z適ROX Reference Dye濃度見下表:

儀器型號

使用濃度

ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/StepOne/ StepOne Plus

ABI 7500/7500 Fast、QuantStudio ® 3/5QuantStudio 6/7 Flex、ViiA 7、Stratagene Mx3000P/Mx3005PMx4000

RocheBio-Rad、Eppendorf

無需添加

2、蓋上或密封反應(yīng)管/PCR板,輕輕混勻。短暫離心,確保所有組分都在管/板底。

二、進行Real-Time PCR反應(yīng)

1、建議采用兩步法PCR反應(yīng)程序進行反應(yīng)。

兩步法反應(yīng)程序:

步驟

溫度

持續(xù)時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

95℃

5min

1

變性

95℃

10sec

40

退火延伸數(shù)據(jù)采集

60℃

30sec

40

熔解曲線分析

根據(jù)儀器程序設(shè)置

 當(dāng)模板量較低等因素導(dǎo)致擴增效果不佳,可使用三步法程序進行PCR反應(yīng)。

三步法反應(yīng)程序:

步驟

溫度

持續(xù)時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

95℃

5min

1

變性

95℃

10sec

40

退火

50-60℃

30sec

40

延伸數(shù)據(jù)采集

72℃

30sec

40

熔解曲線分析

根據(jù)儀器程序設(shè)置

 2、上機檢測:將反應(yīng)體系置于熒光定量 PCR 儀中,運行程序收集數(shù)據(jù)并分析結(jié)果。

Biosharp BL698A熒光定量PCR試劑盒(5X1mL)

 

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