.細(xì)胞欺負(fù)生手,也就是消化、吹打操作還有有一定影響的。
2.細(xì)胞生長不好與培養(yǎng)基直接相關(guān),培養(yǎng)基中影響zui為嚴(yán)重的就是牛血清。
3.支原體污染也是重要原因。但是正如上面朋友講的,支原體在普通光學(xué)顯微鏡下是讀不到的。我曾經(jīng)檢測過支原體污染,用的是牛心浸出液,即:將牛心去結(jié)締組織,剁碎,浸煮,過濾,然后加瓊脂成半固體。將細(xì)胞培養(yǎng)液做穿刺接種,有支原體者,圍繞穿刺管道,會(huì)長出云霧狀菌落。
4.細(xì)菌污染:有個(gè)別情況,細(xì)菌生長非常緩慢,似乎不太使細(xì)胞培養(yǎng)液體混濁,這個(gè)情況我遇到過多次。
5.環(huán)境:細(xì)胞生長不好的時(shí)候,千萬記住要觀察培養(yǎng)箱的二氧化碳的含量和溫度。尤其溫度,一定要看溫度計(jì),而不是看他數(shù)字顯示。二氧化碳的含量可以從你培養(yǎng)細(xì)胞的顏色上觀察,如果細(xì)胞還很稀疏液體就很黃了,多是因?yàn)槎趸嫉暮窟^高。當(dāng)然,要同時(shí)觀察多瓶細(xì)胞,而不是一瓶。還有,消化液不合適也會(huì)影響。
6.還曾經(jīng)遇到洗液配制不合適。