細(xì)胞凝集反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)原理和方法

時(shí)間：2014/11/28閱讀：870

實(shí)驗(yàn)原理

細(xì)胞膜是雙層脂鑲嵌蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，脂和蛋白質(zhì)又能與糖分子結(jié)合為細(xì)胞表面的分枝狀糖外被。目前認(rèn)為：細(xì)胞間的，細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化，免疫反應(yīng)和腫瘤發(fā)生都和細(xì)胞表面的分枝狀糖分子有關(guān)。

凝集素(lectin)是一類含糖的(少數(shù)例外)并能與糖等專一性結(jié)合的蛋白質(zhì)，它具有凝集細(xì)胞刺激細(xì)胞分裂的作用。凝集素使細(xì)胞凝集是由于它與細(xì)胞表面的糖分子連接，在細(xì)胞間形成橋的結(jié)果，加入與凝集素互補(bǔ)的糖可以抑制細(xì)胞的凝集。

實(shí)驗(yàn)用品

　　1、土豆塊莖。
　　2、顯微鏡、粗天平、載玻片、滴管2支、離心管2支。
　　3、PBS緩沖液
　　稱取NaC 17.2g、Na2HP04 1.48g、KH2PO40.43g、加蒸餾水，定容至1000ml調(diào)pH值到7.2。
　　4、2％的紅細(xì)胞。

以無(wú)菌方法抽取兔子靜脈血液(加抗凝劑)，用生理鹽水洗5次，每次2000r/min，離心5min，zui后按壓積紅細(xì)胞體積用生理鹽水配成2%紅細(xì)胞液。

實(shí)驗(yàn)方法

稱取土豆去皮塊莖2g，加10ml PBS緩液，漫泡2h，浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集索。

用滴管吸取土豆凝集素和2%紅細(xì)胞液各一滴，置載玻片上，充分混勻，靜置20min后于低倍顯微鏡下觀察血球凝集現(xiàn)象。

以PBS液加2%血細(xì)胞液作對(duì)照實(shí)驗(yàn)。

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