一、原理
細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。
單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法，但它不能代表細胞群體的周期，故現(xiàn)多采用其他方法測群體周期。測定細胞周期的方法很多，有同位素標記法、細胞計數(shù)法等，這里介紹一種利用BrdU滲入測定細胞周期的方法。
BrdU（5-溴脫氧核苷）加入培養(yǎng)基后，可做為細胞DNA復制的原料，經過兩個細胞周期后，細胞中兩條單鏈均含BrdU的DNA將占l/2，反映在染色體上應表現(xiàn)為一條單體淺染。如經歷了三個周期，則染色體中約一半為兩條單體均淺染，另一半為一深一淺。細胞如果僅經歷了一個周期，則兩條單體均深染。計分裂相中各期比例，就可算出細胞周期的值。
二、 儀器、用品與試劑
1. 儀器、用品：同常規(guī)細胞培養(yǎng)。
2. 試劑：BrdU（1.0 mg/ml），甲醇、冰醋酸，Giemsa染液，秋水仙素，2×SSC液。
三、操作步驟
1. 細胞生長至指數(shù)期時，向培養(yǎng)液中加入BrdU，使zui終濃度為10 μg/ml。
2. 44小時加秋水仙素，使每ml中含0.1 μg。
3. 48小時后常規(guī)消化細胞至離心管中，注意培養(yǎng)上清的漂浮細胞也要收集到離心管中。
4. 常規(guī)染色體制片（見第三部分：染色體技術）。
5. 染色體玻片置56℃水浴鍋蓋上，鋪上2×SSC 液，距紫外燈管6 cm處紫外照射30分鐘。
6. 棄去2×SSC液，流水沖洗。
7. （Giemsa液染色10分鐘，流水沖洗，晾干。
8. 鏡檢100個分裂相，計*、二、三、四細胞期分裂指數(shù)。
9. 計算：
細胞周期（Tc）=48/{（M1+2M2+3M3+4M4）/100}（小時）
