潮霉素是由鏈霉菌產生的氨基糖苷類抗生素。潮霉素分為兩種,其中的潮霉素B(Hygromycin B)起初被作為動物用藥加入飼料中,20世紀80年代后開始應用于基因篩選等實驗中。
潮霉素是由鏈霉菌(Streptomyces hygroscopious)產生的氨基糖苷類抗生素。潮霉素有A,B兩種組分。潮霉素A:白SF末,熔點105~109℃,旋光度[α]D25-126°(c=1,水)。易溶于水與甲醇,不溶于非極性溶劑。對金葡菌209P、肺炎桿菌與人型結核桿菌的zui小抑菌濃度MIC為25、12.5與1.56μg/ml,對溝端螺旋體、支原體亦有作用。實驗室用的潮霉素一般為潮霉素B(Hygromycin B)。
潮霉素B在20世紀50年代被發(fā)現,當時用作動物用藥。而現在它仍然作為驅蟲抗蟲藥被加入雞和豬的飼料中。用于產生潮霉素的吸水鏈霉菌在1953年被從土壤中分離并獲得純培養(yǎng)。潮霉素B相關的抗性基因發(fā)現于20世紀80年代早期。
潮霉素B與大多數氨基糖苷類抗生素一樣,通過抑制蛋白質的合成來阻止微生物生長。它可以穩(wěn)定核糖體大亞基上的tRNA結合位點,導致空載tRNA不能脫離核糖體,抑制了翻譯的繼續(xù)進行,潮霉素的抑制作用對于原核細胞與真核細胞的核糖體都是有效的。
在實驗室中,潮霉素B被用于選擇和保持擁有潮霉素抗性基因的原核和真核細胞。潮霉素抗性基因編碼一個激酶(潮霉素激酶),它通過磷酸化潮霉素B使其失活。自從潮霉素的抗性基因被發(fā)現以來,潮霉素B就被用來作為轉基因實驗中的標準篩選方法。目前植物組織培養(yǎng)中常用潮霉素B進行篩選。
潮霉素B的基本性質:
英文名稱:Hygromycin B
分子式: C20H37N3O13
相對分子質量:527.52008 [g/mol]
PubChem: 35766
pKa:7.1 and 8.8
熔點:160-180℃
保存條件:2~8℃,避光
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簡介:Hygromycin B is a unique aminoglycoside antibiotic that inhibits the growth of prokaryotic (bacteria) and eukaryotic microorganisms (yeasts) and mammalian cells. Inhibits protein synthesis at the translocation step on the 70S ribosome and causes misreading of the mRNA. Hph, a gene from E. coli, encodes resistance to hygromycin B and can be isolated and cloned by recombinant DNA techniques. This hygromycin B-resistance gene is particularly useful for identification or selection of recombinant clones in a variety of cell types. Hygromycin B penetrates cells that have been permeabilized by virus infection and can hence act as an effective antiviral agent. (大腸桿菌天然有一定抵抗潮霉素的能力)
工作濃度: 原核生物(e.g., E. coli, at 100 mg/ml); 低等真核生物(e.g., yeast, at 200 mg/ml) 以及高等動物 (e.g., mammalian cells in culture, 150-400 mg/ml)
溶液配制及保存:Hygromycin B具有水溶性, 濃度 >50 mg/mL, 2-8℃的條件下,其水溶液可貯存5年以上。潮霉素B亦可溶于甲醇或乙醇。Hygromycin B溶液需要過濾除菌,不可高溫滅菌
熱穩(wěn)定性:在37℃ 到60℃條件下,Hygromycin B水溶液可至少保存一個月。