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尿素酶

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  • 上海泛柯實(shí)業(yè)有限公司
  • 2016-03-21 22:31:37
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【簡(jiǎn)單介紹】

GB006尿素酶20支

【詳細(xì)說(shuō)明】

尿素酶 詳細(xì)資料:

概述 
 尿素酶是一種人和動(dòng)物胃腸道及泌尿道細(xì)菌感染中常見(jiàn)的酶,它既是人和動(dòng)物中某些致病菌的致病因子之一,又是某些氮源性*物轉(zhuǎn)化所必須具備的酶之一. 它是人類(lèi)*獲得晶體并發(fā)現(xiàn)含有Ni離子的金屬酶〔7〕。   又名脲酶,詳見(jiàn)百科“脲酶”詞條。編輯本段的理化性狀  Hp除有的一般理化性狀外,還有其*性. Hp分子量為550KDa左右,直徑13nm,等電點(diǎn)5.99±0.03,zui適溫度45℃,zui適pH 8.2. Km值0.3mmol/L±0.1mmol/L,在飽和條件下純化的活性為每毫克蛋白質(zhì)每分鐘水解1100μmol±?200μmol尿素,較低Km值有助于Hp的在尿素濃度較低的人胃環(huán)境中始終處于飽和狀態(tài)而發(fā)揮zui大的功能. Hp單體由A,B兩個(gè)亞單位組成,呈六聚體,A,B兩個(gè)亞單體的Mr分別為30000和64000左右,其比例為1∶1,而其他菌屬所含則有三個(gè)亞單位組成. Hp的量很大,占全菌蛋白的5%~10%. 一般為胞質(zhì)蛋白,而Hp具有大量高活性的胞外,Hp產(chǎn)生的活性相當(dāng)于奇異變形桿菌的2倍,陽(yáng)性腸道菌的7倍,故活性的測(cè)定可以作為Hp的快速診斷方法。編輯本段大豆粕中的測(cè)定:測(cè)定方法1
  方法名稱(chēng):尿素— *紅法(美國(guó)大豆協(xié)會(huì))   1 原理   活性是大豆餅粕類(lèi)加工正確與否的標(biāo)志,它的活性的高低與大豆餅粕加工(熱)程度有直接關(guān)系,此方法是在指示劑*磺存在的條件下,按尿素轉(zhuǎn)變成氨的方法定性測(cè)定豆粕中的活性。   2 試劑   (1)0.1mol/L硫酸(將6ml濃硫酸緩緩注入1000ml水中)  ?。?)0.2mol/L氫氧化鈉:取0.8g氫氧化鈉加蒸餾水,溶解成100ml   (3)尿素— *紅(別名:酚磺肽、酚紅)試劑:將 1.2g*紅溶于30mL0.2mol/L氫氧化鈉溶液中,用蒸餾水稀釋至300mL;加入90g尿素并溶解之,用蒸餾水稀釋至 2L;加 70mL0.1mol/L硫酸;稀釋至3L。   注意:配好的溶液應(yīng)具有明亮的琥珀色,若溶液轉(zhuǎn)變成桔紅色時(shí),應(yīng)滴加0.1mol/L硫酸,調(diào)至呈琥珀色,試劑在試驗(yàn)前配制,現(xiàn)配現(xiàn)用。尿素—*紅試劑有效期僅90天。   3.測(cè)定方法  ?。?)取粉碎好的豆粕,均勻地平鋪于培養(yǎng)皿中(注意鋪薄薄一層)。   (2)用滴管吸取尿素— *紅試劑,小自心滴在被測(cè)定的樣品中,將培養(yǎng)皿中豆粕全部浸濕。  ?。?)放置5分鐘后觀(guān)察結(jié)果:  ?、?zèng)]有任何紅點(diǎn)出現(xiàn),再放置25分鐘,若還無(wú)紅點(diǎn)出現(xiàn),說(shuō)明沒(méi)有活性,是豆粕加工過(guò)熟了。  ?、谟猩贁?shù)紅點(diǎn),為少量活性,豆粕可用。   ③豆粕表面有25%的紅點(diǎn)覆蓋,有少量活性,可用。   ④豆粕表面出現(xiàn)50%的紅點(diǎn)覆蓋,活性大,應(yīng)慎用。  ?、荻蛊杀砻娴?75%一*為紅點(diǎn)覆蓋,活性很高,說(shuō)明豆粕過(guò)生,無(wú)法使用。
測(cè)定方法2
  名稱(chēng):酚紅指示劑   1、原理   酚紅指示劑在PH6.4—8.2時(shí)由黃變紅,大豆制品中所含的,在室溫下可將尿素水解,產(chǎn)生氨,釋放的氨可使酚紅指示劑變紅,根據(jù)變紅時(shí)間長(zhǎng)短來(lái)判斷活性大小。   2、儀器和試劑  ?。?) 粉碎裝置:粉碎時(shí)應(yīng)不產(chǎn)生強(qiáng)烈發(fā)熱(如研體球磨機(jī))   (2) 天平:感量0.01g  ?。?) 試管:直徑1.8cm,長(zhǎng)15cm  ?。?) 尿素:分析純   (5) 酚紅:分析純、0.1%乙醇(20%)溶液   3、測(cè)定步驟   將試樣研細(xì),稱(chēng)取0.02g試樣,稱(chēng)準(zhǔn)至0.01g重,轉(zhuǎn)入試管中,加入0.02g結(jié)晶尿素及兩滴酚紅指示劑,加20—30mL蒸餾水,搖動(dòng)10s鐘。觀(guān)察溶液顏色,并記下呈粉紅色的時(shí)間。   4、活性的測(cè)定結(jié)果表示:   (1)1分鐘內(nèi)呈粉紅色為活性很強(qiáng)。  ?。?)1—5分鐘內(nèi)呈粉紅色為活性強(qiáng)。   (3)5—15 分鐘內(nèi)呈粉紅色為有點(diǎn)活性。  ?。?)15—30分鐘內(nèi)呈粉紅色為沒(méi)有活性。   通常10分鐘以上不顯粉紅色或紅色的大豆制品,其活性即可認(rèn)為合格。

產(chǎn) 品 名 稱(chēng) 產(chǎn)品貨號(hào) 規(guī)格(ml) 產(chǎn)品說(shuō)明及用途
GB006 20支 /

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產(chǎn) 品 名 稱(chēng) 規(guī)格(ml) 產(chǎn)品說(shuō)明及用途
皰肉牛肉粒   100 加入皰肉基礎(chǔ),配成皰肉培養(yǎng)基
Dried Meat Particle
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ) 250 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MercK標(biāo)準(zhǔn)
Buffered Listeria Enrichment Broth
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)添加劑 1ml*5 每支加入225ml緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)中
Buffered Listeria Enrichment Broth Supplement
PALCAM 瓊脂 250 用于單增李氏菌選擇性分離
PALCAM Agar FDA標(biāo)準(zhǔn))
PALCAM添加劑 1mg/*10 添加到HB4188中,用于李氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
PALCAM Supplement
LPM瓊脂 250 用于單增李氏菌選擇性分離加入七葉苷和檸檬酸鐵銨FDA標(biāo)準(zhǔn))
LPM Agar
Half –Fraser 培養(yǎng)基 250 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn))
Half-Fraser Medium
Half –Fraser 添加劑 5ml*2 添加到HB4190中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
Half-Fraser Supplement
改良緩沖蛋白胨水(MBP) 250 用于單增李氏菌前增菌培養(yǎng)
Modified Buffered Peptone Water SN標(biāo)準(zhǔn))
EB增菌液 250 用于單增李氏菌選擇性增菌培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
EB Enrichment Broth
Fraser 培養(yǎng)基 250 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn))
Fraser Medium
Fraser 添加劑 5ml*2 添加到HB4193中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
Fraser Supplement
UVM培養(yǎng)基 250 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn))
UVM Medium
UVM 添加劑1 1ml*10 添加到HB4195中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
UVM Supplement1
LM-137瓊脂 250 用于膜濾法單增李氏菌選擇性分離(NEOGEN標(biāo)準(zhǔn))
LM-137 Agar

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