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所 在 地上海市
更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):1003次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線球孢白僵菌PCR檢測試劑盒使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。產(chǎn)品名稱:球孢白僵菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Beauveria bassianaPCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
性能指標:點擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.球孢白僵菌PCR檢測試劑盒試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
球孢白僵菌PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。?Diphenyl ether二醚克CP,99.5%
Dipentyl phthalate鄰酞二正酯00毫克AR,96%
DIPEAN,N-二異基0克CP
DIPCDIN,N'-二異基二酰亞0克超純,99%
Dioscin薯蕷皂甙25克BR,
DIOP鄰二二辛酯00克CP,94%
DINP鄰二羧-二-C8-0支鏈基酯25克AR,
Di-n-octylamine二辛基00毫克BR,
Di-n-octyl sebacate皮脂二正辛酯500克AR,
dIMP2′-脫氧-5′-單磷二鹽克BR,90%
Dimethylsilicone fluid硅OV-025克AR,85%
Dimethylsilicone fluid二基硅油0克GR,85%
Dimethylphosphinic acid二膦500毫克AR,
Dimethylglyoxime disodium salt octahydrate二基5克5N
Dimethylglyoxime二基酰肟克CP,40%
球孢白僵菌PCR檢測試劑盒甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷(95%) 英文名稱:Liguiritigenin-7-O-D-apiosyl-4’-O-D-glucoside CAS號:99796-2-8 規(guī)格:0mg
去甲駱駝蓬堿 英文名稱:Harmolol CAS號:525-57-5 規(guī)格:0mg
羊藿苷A 英文名稱:Epimedoside A CAS號:3902-04-9 規(guī)格:0mg
寶藿苷VI 英文名稱:Baohuoside VI CAS號:9760-73-5 規(guī)格:0mg
異鼠李素-3-O-刺槐二糖苷 英文名稱:Isorhamnetin-3-O-robinobioside CAS號:53584-69-3 規(guī)格:0mg
粘酸 英文名稱:Mucic acid CAS號:526-99-8 規(guī)格:20mg
青陽參苷元-3-O-beta-D-磁麻糖苷 英文名稱:Qingyangshengenin-3-O-beta-D-cymaropyranoside CAS號: 規(guī)格:
飛蓬苷 英文名稱:Erigeroside CAS號:5929-76-0 規(guī)格:5mg
飛蓬酯乙 英文名稱:Erigoster B CAS號:849777-6-3 規(guī)格:5mg
三十醇 英文名稱:Triacontanol CAS號:593-50-0 規(guī)格:20mg
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