兔抗小鼠IgG-FC免疫血清抗體*,兔抗小鼠IgG-FC免疫血清抗體用于免疫組化實驗，WB實驗，相應(yīng)的標(biāo)記抗體有HRP標(biāo)記抗體，F(xiàn)ITC標(biāo)記，BIO等。

【貯存條件】： 貯存于-20℃. 本品應(yīng)在低溫下保存，長時間在暴露在空氣中，含量會有所降低。

規(guī)格：0.5ml

材料和方法

　　. 材料 人成骨肉瘤MG63細(xì)胞為本實驗室保存。重組質(zhì)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王巖教授惠贈。脂質(zhì)體 2000( Invitrogen公司)。高糖DMEM培養(yǎng)基(美國Gibco 公司)，胎牛血清(Hyclone公司)，和EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨科技有限公司)。

　　.2 蛋白印跡實驗 MG63細(xì)胞鋪于35 mmol/L培養(yǎng)皿中，待細(xì)胞密度達(dá)到60%～70%時，轉(zhuǎn)染MycSSHL，48 h后換無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)3 h，分別加入濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育0 min后裂解細(xì)胞，離心取上清加入凝膠加樣緩沖液,沸水浴上加熱5 min，上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜、雜交〔一抗分別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色。

　　.3 體外激酶測定 MycSSHL(WT)及其突變體MycSSHL(2 SA)分別轉(zhuǎn)染至MG63細(xì)胞，48 h后采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體?；厥誐ycSSHL，加入0.6 μg/ml重組活性CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 于 20 μl 激酶反應(yīng)緩沖液中，30℃反應(yīng)40 min。反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行SDSPAGE電泳、轉(zhuǎn)膜，應(yīng)用放射自顯影技術(shù)檢測32P 標(biāo)記的SSHL水平。

　　.4 體外SSHL磷酸酶活性測定實驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉(zhuǎn)染至MG63細(xì)胞，48 h后，采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體?；厥誐ycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 于 20 μl 反應(yīng)緩沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應(yīng)2 h。反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行SDSPAGE電泳、轉(zhuǎn)膜、雜交(一抗分別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯色。

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鼠抗人分泌成分單克隆抗體    Secretory Component(SC)       小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子βSDF-β/CXCL2抗體    0.5ml
470    鼠抗人血清素單克隆抗體    Serotinin        小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子aSDF-a/CXCL2抗體    0.5ml
47    兔抗人5-羥色胺多克隆抗體    Serotonin       小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶AMMP-2/Gelatinase A抗體    0.5ml
472    鼠抗人血清素（5-羥色胺）單克隆抗體    Serotonin        小鼠肌球蛋白MYS抗體    0.5ml
473    鼠抗人Sialy-Tn單克隆抗體    Sialy-Tn(CD75s)        小鼠肌紅蛋白MYO/MB抗體    0.5ml
474    兔抗人多克隆抗體    Somatostatin      小鼠肌鈣蛋白TTn-T抗體     0.5ml
475    兔抗人受體多克隆抗體    Somatostatin Receptor-     小鼠肌鈣蛋白ⅠTn-Ⅰ抗體    0.5ml
476    兔抗人P物質(zhì)多克隆抗體    Substance P        小鼠活化素AACV-A抗體     0.5ml
477    鼠抗人表面活性蛋白B單克隆抗體    Surfactant Protein B       小鼠活化素AACV-A抗體    0.5ml
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