羊抗牛IgG免疫血清抗體*,羊抗牛IgG免疫血清抗體用于免疫組化實驗，WB實驗，相應(yīng)的標(biāo)記抗體有HRP標(biāo)記抗體，F(xiàn)ITC標(biāo)記，BIO等。

【貯存條件】： 貯存于-20℃. 本品應(yīng)在低溫下保存，長時間在暴露在空氣中，含量會有所降低。

規(guī)格：0.5ml

材料和方法

　　. 材料 人成骨肉瘤MG63細胞為本實驗室保存。重組質(zhì)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王巖教授惠贈。脂質(zhì)體 2000( Invitrogen公司)。高糖DMEM培養(yǎng)基(美國Gibco 公司)，胎牛血清(Hyclone公司)，和EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)?？贵w：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨科技有限公司)。

　　.2 蛋白印跡實驗 MG63細胞鋪于35 mmol/L培養(yǎng)皿中，待細胞密度達到60%～70%時，轉(zhuǎn)染MycSSHL，48 h后換無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)3 h，分別加入濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育0 min后裂解細胞，離心取上清加入凝膠加樣緩沖液,沸水浴上加熱5 min，上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜、雜交〔一抗分別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色。

　　.3 體外激酶測定 MycSSHL(WT)及其突變體MycSSHL(2 SA)分別轉(zhuǎn)染至MG63細胞，48 h后采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體?；厥誐ycSSHL，加入0.6 μg/ml重組活性CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 于 20 μl 激酶反應(yīng)緩沖液中，30℃反應(yīng)40 min。反應(yīng)產(chǎn)物進行SDSPAGE電泳、轉(zhuǎn)膜，應(yīng)用放射自顯影技術(shù)檢測32P 標(biāo)記的SSHL水平。

　　.4 體外SSHL磷酸酶活性測定實驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉(zhuǎn)染至MG63細胞，48 h后，采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體?；厥誐ycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 于 20 μl 反應(yīng)緩沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應(yīng)2 h。反應(yīng)產(chǎn)物進行SDSPAGE電泳、轉(zhuǎn)膜、雜交(一抗分別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯色。

本公司更多產(chǎn)品優(yōu)惠:

大鼠5脂加氧酶5-LO/LOX抗體        FAS 免疫組化檢測抗體 H,M,R,Rb        鈣激活的2抗體
大鼠7羥皮質(zhì)類固醇7-OHCS抗體       FAS 免疫組化檢測抗體 H,M,R,Rb       鈣調(diào)節(jié)蛋白-抗體
大鼠7羥孕酮7-OHP抗體       FAS-L 免疫組化檢測抗體 H,M,R,Rb        鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體
大鼠7-酮類固醇7-KS抗體        磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體
大鼠Ⅰ型膠原Col Ⅰ抗體       Fas免疫組化檢測抗體H        鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗體 
大鼠Ⅰ型膠原C端肽CTX-Ⅰ抗體        FGF2 免疫組化檢測抗體 H,M,R,Rb        鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗體
大鼠Ⅰ型膠原N末端肽NTX抗體         Park7/DJ-/CAP抗體
大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽ⅠCTP抗體         FGFR 免疫組化檢測抗體 H,M,R,Rb       環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體
大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽CⅠCP抗體       HSP70 免疫組化檢測抗體 H,M,R,Rb        心肌肌鈣蛋白抗體
大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽PⅠNP抗體       JUN 免疫組化檢測抗體 H,M,R,Rb       碳酸酐酶抗體
大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽PⅠCP抗體       Ki-67免疫組化檢測抗體H        粘附分子相關(guān)蛋白a抗體
大鼠25羥基325OHD3/25 HVD3抗體        LRP免疫組化檢測抗體H        碳酸酐酶2抗體