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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光-PCR法>> 人皰疹病毒(HHV)核酸檢測試劑盒品牌
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2019-04-17 12:31:22瀏覽次數(shù):575次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線大豆內(nèi)源基因Lectin核酸檢測試劑盒供應(yīng)商
產(chǎn)品名稱:人皰疹病毒(HHV)核酸檢測試劑盒品牌
規(guī)格:48T/盒
類別:熒光-PCR法
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。?
性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月
?
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。?三氧化二鈰 2 ug pThio-His A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
溴化鎳 2 ug pTK-Hyg 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
高氯鋇 2 ug pTK-Luc 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
磷二氫鈉 2 ug pTracer CMV2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
焦磷鈉 2 ug pTracer EF/V5-His A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
(T-4)-鎢鈉 2 ug pTrc99a 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
5-溴-2-甲氧基啶 2 ug pTrcCKS 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
聯(lián)苯甲酰 2 ug pBAD His C-LacZ 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
4-基二苯甲酮 2 ug pTrcHis A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2-甲氧苯甲 2 ug pTrcHis 2b 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
肌氨酯鹽鹽 2 ug pBAD His C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
DL-丙氨酯鹽鹽 2 ug pTrcHis B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
九水偏硅鈉 2 ug pBAD/gIII A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2-羥基萘 2 ug pTrcHis C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
3-基甲酯 2 ug pBAD/gIII B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
人皰疹病毒(HHV)核酸檢測試劑盒品牌ALD 大鼠固酮 CAS: 63690-56-2 規(guī)格: g
NA 大鼠 CAS: 0638-68- 規(guī)格: 200mg
VZV-IgG(Varicella zoster virus IgG) 人水痘帶狀皰疹病毒IgG CAS: 5743-49-7 規(guī)格: g
LP Ab-IgA(Legionella antibody IgA) 人軍團(tuán)菌抗體IgA CAS: 37-08-6 規(guī)格: 200mg
PGF 大鼠前列腺素F CAS: 267-74-7 規(guī)格: g
LP Ab-IgM (Legionella antibody IgM) 人軍團(tuán)菌抗體IgM CAS: 5793-89-5 規(guī)格: 200mg
PGE 大鼠前列腺素E CAS: 592-23-0 規(guī)格: 2g
CORT 大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮 CAS: 464-49-3 規(guī)格: g
LP Ab-IgG(Legionella antibody IgG) 人軍團(tuán)菌抗體IgG CAS: 8006-44-8 規(guī)格: 250mg
paramyxovirus parotitis IgM 人腮腺炎病毒IgM CAS: 403-7-4 規(guī)格: 200mg
ET- 大鼠內(nèi)皮素 CAS: 5436-50-9 規(guī)格: 200mg
paramyxovirus parotitis IgG 人腮腺炎病毒IgG CAS: 66335-38-4 規(guī)格: 0mg
BK 大鼠血管舒緩激肽 CAS: 436349 規(guī)格: 20mg
EBv IgM(epstein-barr virus IgM) 人EB病毒IgM CAS: 24-07-2 規(guī)格: 300mg
Resistin 大鼠抵抗素 CAS: 404-86-4 規(guī)格: 00mg
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