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人輪狀病毒IgA(RV-IgA)ELISA試劑盒說明書

2012年10月28日 22:31:33人氣:640來源:上海研盟生物科技有限公司

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關(guān) 鍵 詞人輪狀病毒IgAELISA試劑盒,ELISA試劑盒說明書,人RV-IgA試劑盒
【資料簡介】

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人輪狀病毒IgA(RV-IgA)酶聯(lián)免疫分析

試劑盒使用說明書

    本試劑盒僅供研究使用。                                            48T

藥品名稱:
通用名:人輪狀病毒 IgA(RV-IgA )酶聯(lián)免疫分析試劑盒
使用目的:
    本試劑盒定性測定人血液、或其它相關(guān)組織中輪狀病毒 IgA(RV-IgA )。
實(shí)驗(yàn)原理:
    本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA )測定標(biāo)本中人輪狀病毒IgA(RV-IgA )。
用純化的輪狀病毒 IgA(RV-IgA )抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中輪狀病毒
IgA(RV-IgA )抗原相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與 HRP 標(biāo)記的輪狀病
毒 IgA(RV-IgA )抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB
顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀
在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),與 CUTOFF 值相比較,從而判定標(biāo)本中人輪狀病毒
IgA(RV-IgA )的存在與否。
試劑盒組成:

  1   20 倍濃縮洗滌液         20ml ×1 瓶    7   終止液                      3ml ×1 瓶

  2   酶標(biāo)試劑              3ml ×1/瓶     8   陽性對照                     0.5ml ×1 瓶

  3   酶標(biāo)包被板             12 孔×4 條     9   陰性對照                     0.5ml ×1 瓶

  4   樣品稀釋液             3ml ×1 瓶     10  說明書                      1 份

  5   顯色劑 A 液           3ml ×1 瓶     11  封板膜                      2 張

  6   顯色劑 B 液           3ml ×1 瓶     12  密封袋                      1 個(gè)

標(biāo)本要求:
    1.標(biāo)本處理:血清、血漿標(biāo)本可直接檢測
    2 .標(biāo)本按要求制備后盡早進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如不能及時(shí)檢測,可將標(biāo)本在-20℃保存一個(gè)月,
       但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
    3.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP )活性。
操作步驟:
1.  編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1
    孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.  加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照(標(biāo)準(zhǔn)品)50μl。然后在待測
    樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,
    盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.  溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30 分鐘。
4.  配液:將 30 倍濃縮洗滌液加蒸餾水至 600ml 后備用
5.  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
    重復(fù) 5 次,拍干。
6.  加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.  溫育:操作同 3 。
8.  洗滌:操作同 5。
9.  顯色:每孔先加入顯色劑 A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
    15分鐘
10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止
    液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人輪狀病毒IgA(RV-IgA)ELISA試劑盒說明書

結(jié)果判定:
    試驗(yàn)有效性:陽性對照孔平均值≥1.00;  陰性對照平均值≤0.15
    臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值= 陰性對照孔平均值+0.15
    陰性判定:樣品OD 值<          臨界值(CUT OFF)者為輪狀病毒IgA(RV-IgA )陰性
    陽性判定:樣品OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為輪狀病毒IgA(RV-IgA )陽性
注意事項(xiàng)
1.操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,本試劑不同批號組分不得混用。
2 .試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
   用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3 .濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
4 .封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5 .底物請避光保存。
6 .試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長檢測時(shí),參考波長為630nm
7 .所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為 2M  的硫酸,使用時(shí)必須
   注意安全。

保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2 .有效期:6 個(gè)月
人輪狀病毒IgA(RV-IgA)ELISA試劑盒說明書

上海研盟生物科技有限公司 作者

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