引言

手冊(cè)目的 
細(xì)胞培養(yǎng)簡(jiǎn)介 
　 什么是細(xì)胞培養(yǎng)？ 
　 有限細(xì)胞系與連續(xù)細(xì)胞系 
　 培養(yǎng)條件 

　 凍存 

　 培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài) 
　 細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用 
　 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室 

安全 
　 生物安全性等級(jí) 
　 安全數(shù)據(jù)表 
　 安全設(shè)備
　 個(gè)人防護(hù)設(shè)備 (PPE) 
　 實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范 

細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備
　 基本設(shè)備 
　 擴(kuò)增設(shè)備 
　 其他用品

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室
　 無菌工作區(qū)域
　 細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥
　 細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥布局
　 培養(yǎng)箱
　 儲(chǔ)存 
　 低溫儲(chǔ)存
　 細(xì)胞計(jì)數(shù)器 

無菌技術(shù) 
　 簡(jiǎn)介 
　 無菌工作區(qū)域
　 良好的個(gè)人衛(wèi)生 
　 無菌試劑和培養(yǎng)基 
　 無菌操作 

生物污染 
　 簡(jiǎn)介
　 細(xì)菌 
　 酵母 
　 霉菌 
　 病毒 
　 支原體
　 交叉污染
　 抗生素的使用 

細(xì)胞培養(yǎng)基本知識(shí)
　細(xì)胞系
　 選擇合適的細(xì)胞系
　 獲取細(xì)胞系 
　

培養(yǎng)環(huán)境 
　 貼壁培養(yǎng)與懸浮培養(yǎng)
　 培養(yǎng)基 
　 pH 值 
　 二氧化碳 
　 溫度 
　

細(xì)胞形態(tài)
哺乳動(dòng)物細(xì)胞
　 哺乳動(dòng)物細(xì)胞形態(tài)差異 
　 293 細(xì)胞的形態(tài) 
昆蟲細(xì)胞 
　 Sf21 細(xì)胞的形態(tài) 
　 Sf9 細(xì)胞的形態(tài)

方法 
　 細(xì)胞培養(yǎng)維持指導(dǎo)原則 
　 什么是傳代？ 
　 何時(shí)傳代？
　 常用細(xì)胞系推薦使用培養(yǎng)基 
　 貼壁細(xì)胞的解離 
　 TrypLE? 解離酶 
　

貼壁細(xì)胞的傳代
　 所需材料 
　 貼壁細(xì)胞傳代流程 
　 貼壁昆蟲細(xì)胞傳代的注意事項(xiàng)
　

懸浮細(xì)胞的傳代 
　 懸浮細(xì)胞的傳代 
　 懸浮培養(yǎng)容器 
　 所需材料 
　 懸浮細(xì)胞傳代流程 
　 懸浮昆蟲細(xì)胞傳代的注意事項(xiàng) 

細(xì)胞的冷凍 
　 凍存 
　 細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則
　 凍存培養(yǎng)基 
　 所需材料 
　 培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案 
　 冷凍細(xì)胞的解凍
　 細(xì)胞解凍指導(dǎo)原則
　 所需材料 

冷凍細(xì)胞解凍方案 
　 支持技術(shù)方案
　 利用血球計(jì)數(shù)器進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù) 
　 臺(tái)盼藍(lán)拒染法 
　 濃縮細(xì)胞 
　

附錄 43
　 疑難解析 
　 細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品
　 細(xì)胞系 
　 哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基
　 昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基 
　 細(xì)胞培養(yǎng)用血清產(chǎn)品 
　 細(xì)胞培養(yǎng)用實(shí)驗(yàn)試劑 
　 抗生素和抗真菌劑
　 細(xì)胞培養(yǎng)用輔助產(chǎn)品 
　 生長(zhǎng)因子和純化蛋白 
　 轉(zhuǎn)染和選擇 
　 轉(zhuǎn)染試劑 
　

其他資源 
　 哺乳動(dòng)物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞培養(yǎng) 
　 細(xì)胞與組織分析 
　 轉(zhuǎn)染選擇工具
　 安全數(shù)據(jù)表 
　 分析證書 

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