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當(dāng)前位置:上海紀(jì)寧實業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>科研干貨:細(xì)胞的實驗設(shè)計的關(guān)鍵
今天提供一套小分文章的實驗套路,基于純細(xì)胞和分子生物學(xué)的藥理學(xué)研究。
1、首先使用時間或是濃度梯度的藥物處理細(xì)胞,這里的細(xì)胞有兩種,一種是細(xì)胞系一種是原代細(xì)胞,這樣減少永生化細(xì)胞對結(jié)果的影響。然后觀察不同濃度和時間處理條件下的細(xì)胞活性,這里的活性檢測可以使用臺盼藍(lán)拒染實驗和LDH毒性試驗。
2、隨后,要使用CCK8排除細(xì)胞增殖對結(jié)果的影響,因為隨著藥物處理時間的延長,細(xì)胞數(shù)量必然會干擾試驗結(jié)果,因此需要通過判斷細(xì)胞的生長周期,來確認(rèn)處理濃度和處理時間。
3、確認(rèn)時間和濃度后,觀察細(xì)胞的功能學(xué)改變,這里就需要涉及到研究的目的了!
例如腫瘤遷移、干細(xì)胞分化、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等,不同的功能實驗取決于你的實驗本身目的。在這一步中,通常要設(shè)計定量和定性研究,例如細(xì)胞增殖,需要判斷細(xì)胞增殖的比例、以及細(xì)胞增殖周期中的蛋白表達(dá)變化。
4、后面的一步是機(jī)制研究,機(jī)制研究主要有三點:通路研究、蛋白相互作用研究和基因轉(zhuǎn)錄前后的研究。可以選擇其中一點來做,也可以三者都做。
通過機(jī)制研究,來解釋藥物作用對細(xì)胞功能學(xué)改變的途徑。
由此形成典型的三步:
1 藥物模型的建立、
2 功能改變的探究、
3 機(jī)制的發(fā)現(xiàn)。
上述研究方法,上海紀(jì)寧有著雄厚技術(shù)的支持,可以幫您完成經(jīng)典的純細(xì)胞分子生物研究,我們有豐富的細(xì)胞庫、扎實的大生物研究經(jīng)驗、以及個性化實驗方案修正,幫助您攻克實驗過程中的各種技術(shù)難關(guān)。更多科研消息,歡迎詳詢上海紀(jì)寧。
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