離子系列_血鋅濃度測試盒_微量法
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
鋅是必需的微量元素之一,在胰島素和卟啉代謝中也起重要作用。
離子系列_血鋅濃度測試盒_微量法
測定原理:
在pH 8.5~9.5的溶液中,Zn2+與鋅試劑生成藍色配位化合物,在620nm有大吸收峰。
自備儀器和用品:
離心機、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水和無水乙醇。
試劑組成和配制:
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前1天配制,加入15mL無水乙醇充分溶解,蓋緊,過夜待用。4℃保存可穩(wěn)定約1個月,如顏色變黃,則已失效。
標準液:液體×1支,10 μ mol/L Zn2+標準液。4℃保存。
測定操作:
1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節(jié)波長到620 nm,蒸餾水調零。
2. 標準液解凍:提前取出標準液,置于室溫下充分解凍后混勻。
3. 空白管:取1.5 mL EP管,依次加入100 μL蒸餾水,100μL試劑一,混勻;室溫,13000g,離心10min,小心吸取上清液100 μL,加入0.5 mL EP管,加入100μL試劑二,100μL試劑三,充分混勻后13000g離心取上清,吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板,620 nm測定吸光度,記為A空白管。
4. 標準管:取1.5 mL EP管,依次加入100 μL標準液,100 μL試劑一,混勻;室溫,13000g,離心10min,小心吸取上清液100 μL,加入0.5 mL EP管,加入100μL試劑二,100μL試劑三,充分混勻后13000g離心取上清,吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板,620 nm測定吸光度,記為A標準管。
5. 測定管:取1.5 mL EP管,依次加入100 μL血清,200 μL試劑一,混勻;室溫,8000g,離心10min,小心吸取上清液100 μL,加入0.5 mL EP管,加入100μL試劑二,100μL試劑三,充分混勻后13000g離心取上清,吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板,620 nm測定吸光度,記為A測定管。
注意:空白管和標準管只需測定一次。