2017 07-17

實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)的污染源有這幾個(gè)，你造嗎？

實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)的污染源有這幾個(gè)，你造嗎？上海子實(shí)生物（細(xì)胞之家）廣義上來(lái)說(shuō)，凡是細(xì)胞培養(yǎng)體系中的外來(lái)成分或成分變化，都應(yīng)視為污染，細(xì)胞污染不能*被消除，但能減少其發(fā)生的頻率和后果的嚴(yán)重性。細(xì)...

2017 07-13

Hela細(xì)胞的傳代

Hela細(xì)胞傳代步驟1.看培養(yǎng)基是否正常，細(xì)胞狀態(tài)如何，細(xì)胞密度如何，決定是否傳代。拿出來(lái)看的時(shí)候把蓋子擰上。2．熱PBS、versene、培養(yǎng)基，(提前做好)瓶子不要倒著放，不要讓液體接觸到瓶塞。3...

2017 07-13

細(xì)胞傳代培養(yǎng)的方法

細(xì)胞傳代培養(yǎng)（消化法）具體操作：一.傳代前準(zhǔn)備：1.預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和*的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。2.用75％酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線(xiàn)照射的超凈工作臺(tái)和雙手。3.正確擺放...

2017 07-12

細(xì)胞培養(yǎng)的需要注意的一些問(wèn)題,部分原因和解決方法

1：培養(yǎng)液pH值變化太快可能原因(1)CO2張力不對(duì)(2)培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊(3)NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足(4)培養(yǎng)液中鹽濃度不正確(5)細(xì)菌、酵母或真菌污染建議解決方法(1)按培養(yǎng)液中NaHCO...

2017 07-12

細(xì)胞培養(yǎng)的一些問(wèn)題

細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題1.液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好？還是冷凍好？要冷藏??！因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí)，其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變，溶液往往變堿，某些成分溶解也會(huì)受到影響對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利。故液體培養(yǎng)基一定要...

2017 07-07

培養(yǎng)基配制

1.配制培養(yǎng)基時(shí)*和hepes添加量之間沒(méi)有必然的。*是必須加的，與培養(yǎng)箱內(nèi)的二氧化碳（溶解在液體內(nèi)就是碳酸）形成碳酸緩沖對(duì)。而HEPES是兩性有機(jī)緩沖劑（既可以緩沖酸也可以緩沖堿），其緩沖能力大大高...

2017 07-07

細(xì)胞冷凍保存方法、注意事項(xiàng)

1.1.欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好(logphase)且存活率高之狀態(tài)，約為80–90％致密度。1.2.冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其*性質(zhì)，例如hybridoma應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有抗體之...

2017 07-06

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本概念

高等生物是由多細(xì)胞構(gòu)成的整體，在整體條件下要研究單個(gè)細(xì)胞或某一群細(xì)胞在體內(nèi)（invivo）的功能活動(dòng)是十分困難的。但是如果把活細(xì)胞拿到體外（invitro）培養(yǎng)進(jìn)行觀察和研究，則要方便得多?；罴?xì)胞離體...

2017 07-06

關(guān)于動(dòng)物血清的常見(jiàn)問(wèn)題及處理方法

血清是細(xì)胞培養(yǎng)中zui重要的元素之一。在實(shí)驗(yàn)室操作中要注意及處理方法：1.血清保存:建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議您無(wú)菌分裝血清至恰...

2017 07-04

大鼠平滑肌細(xì)胞的另一種培養(yǎng)方法

器械顯微器械：眼科剪一把，直彎*各一把，細(xì)結(jié)鑷一把，*一把，針頭諾干殺老鼠器械：*一把，大鑷子一把，彎*一把，*一把，50ml燒杯一個(gè)（錫紙包好）另外：10ml離心管兩個(gè)，培養(yǎng)皿兩個(gè)，10ml的瓶子三...

2017 07-04

beas-2B細(xì)胞與L929細(xì)胞培養(yǎng)

beas-2B細(xì)胞來(lái)源：ATCC。代數(shù)：22代，狀態(tài)上圖。培養(yǎng)基：LHC-8（購(gòu)自GIBCO公司，無(wú)需添加任何生長(zhǎng)因子）。*：0.05%*（購(gòu)自sigma的粉劑自己配制）。消化時(shí)間：10~30秒，寧愿...

2017 06-28

C2分子

C2的序號(hào)似是補(bǔ)體的第2個(gè)成分，但在經(jīng)典激活途徑的激活順序上卻在C4以后被活化。C2分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)已全部搞清楚，它是由723個(gè)氨基酸殘基組成的單肽鏈糖蛋白，分子量約110kDa（圖5-5）。當(dāng)C2與已...

2017 06-26

INS-1 cell 的細(xì)胞培養(yǎng)

INS-1細(xì)胞還是比較好長(zhǎng)的，培養(yǎng)條件是RPMI1640+0.11g/LL-Glutamine+0.11g/L丙酮酸鈉+5.6MMOL/L葡萄糖+50umol/L2–mercaptoethanol+1...

2017 06-26

25格×16格的血球計(jì)數(shù)板使用方法介紹

血球計(jì)數(shù)板介紹用厚玻璃制成。每塊計(jì)數(shù)板由H形凹槽分為2個(gè)同樣的計(jì)數(shù)池。計(jì)數(shù)池兩側(cè)各有一支持柱，將特制的蓋玻片覆蓋其上，形成高0.10mm的計(jì)數(shù)池。計(jì)數(shù)池畫(huà)有長(zhǎng)、寬各3.0mm的方格，分為9個(gè)大方格，每...

2017 06-17

流式細(xì)胞技術(shù)實(shí)驗(yàn)方法

流式細(xì)胞技術(shù)實(shí)驗(yàn)方法PI染色操作步驟1、將單細(xì)胞懸液加入2ml圓底離心管中，離心，1500rpm,5min，棄上清液。2、加入PBS1ml離心洗滌1次，棄上清。3、加入2ml預(yù)冷的70%酒精，4℃固定...

2017 06-17

熒光原位雜交原理及步驟

熒光原位雜交/FISH技術(shù)服務(wù)熒光原位雜交FISH的原理：熒光原位雜交（FluorescenceinsituhybridizationFISH）的基本原理是用已知的標(biāo)記單鏈核酸為探針，按照堿基互補(bǔ)的原...

2017 03-21

什么是細(xì)胞，細(xì)胞是什么？

細(xì)胞（英文名：cell）并沒(méi)有統(tǒng)一的定義，比較普遍的提法是：細(xì)胞是生物體基本的結(jié)構(gòu)和功能單位。已知除病毒之外的所有生物均由細(xì)胞所組成，但病毒生命活動(dòng)也必須在細(xì)胞中才能體現(xiàn)。一般來(lái)說(shuō)，細(xì)菌等絕大部分微生...

2017 03-10

胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程

維持ES細(xì)胞處于未分化狀態(tài)：ES細(xì)胞培養(yǎng)用含有ESGRO（白血病抑制因子）的高糖培養(yǎng)基來(lái)阻止細(xì)胞的分化。為細(xì)胞提供包被有0.1％明膠的平板作為粘附細(xì)胞的基質(zhì)。建議每2－3天從達(dá)到80％－90％融合的平...

2017 03-01

細(xì)胞保種心得

細(xì)胞采購(gòu)的運(yùn)輸形式一般分為兩種，一種是直接寄送凍存細(xì)胞，一種是復(fù)蘇后寄送活細(xì)胞。前者是由液氮中取出細(xì)胞凍存管，采用干冰運(yùn)輸；后者是將細(xì)胞復(fù)蘇至T-25培養(yǎng)瓶中，采用常溫運(yùn)輸。兩者各有優(yōu)缺點(diǎn)，*種方式的...

2017 02-16

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）培養(yǎng)以及成脂、成骨誘導(dǎo)分化

一，C57小鼠BMSCs原代培養(yǎng)1，實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備好相關(guān)手術(shù)器械，培養(yǎng)器材及相關(guān)試劑PBS平衡緩沖液、10％FBS，IMDM培養(yǎng)基。2，脫頸法處死C57小鼠，在75％乙醇中浸泡5min，轉(zhuǎn)移至超凈工作臺(tái)中...