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當前位置:上海懋康生物科技有限公司>>細胞生物學>>細胞增殖與凋亡>> MX3232-20TCaspase-6活性檢測試劑盒細胞增殖

Caspase-6活性檢測試劑盒細胞增殖

參  考  價:930
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 型號

    MX3232-20T

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

20t 930元 12支可售

更新時間:2024-04-22 14:30:50瀏覽次數(shù):572次

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Caspase-6活性檢測試劑盒細胞增殖 Caspases(Cysteine-requiring Aspartate Proteases)是一個高度保守的半胱an酸蛋白酶家族,特異性識別底物中的天冬氨酸殘基,在介導細胞凋亡的過程中發(fā)揮著非常重要的作用。

Caspase-6 Activity Assay Kit (Fluorometric)

Caspase-6活性檢測試劑盒(熒光法)



產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

價格(元)

Caspase-6活性檢測試劑盒(熒光法)

MX3232-20T

20T

930

Caspase-6活性檢測試劑盒(熒光法)

MX3232-100T

100T

2980


產(chǎn)品描述

Caspases(Cysteine-requiring Aspartate Proteases)是一個高度保守的半胱an酸蛋白酶家族,特異性識別底物中的天冬氨酸殘基,在介導細胞凋亡的過程中發(fā)揮著非常重要的作用。Caspases以潛在酶原的形式表達,通過自發(fā)蛋白分解機制或經(jīng)其他蛋白酶(通常是其他caspases)加工處理的方式被活化。人caspases可細分為三大功能組:細胞因子活化(caspase-1,-4,-5和-13),凋亡啟動(caspase-2,-8,-9和-10)和凋亡執(zhí)行(caspase-3,-6和-7)。

Caspase-6(Caspase 6),也稱為Mch-2,執(zhí)行caspases組中主要的成員之一,在凋亡過程中發(fā)揮作用。一旦凋亡誘導發(fā)生,起始caspases(比如caspase-9)被切割和激活。激活的上游caspases進一步處理下游的執(zhí)行caspases(比如:caspase-3和caspase-6),通過將它們切割成大和小亞基,從而啟動caspase級聯(lián)反應,導致凋亡。Caspase-6主要的靶標是膜關(guān)聯(lián)蛋白Lamin A,這個蛋白被切割會引起細胞膜功能錯誤、膜起泡和最終死亡。

Caspase-6活性檢測試劑盒(熒光法)(Caspase-6 Activity Assay Kit, Fluorometric or Caspase-6 Fluorometric Assay Kit)以偶聯(lián)上發(fā)色基團AFC的caspase-6序列特異性的多肽為底物。當?shù)孜锉籧aspase-6剪切后,發(fā)色基團被釋放出來,進而用熒光酶標儀來測定其熒光強度(激發(fā)波長=485nm,發(fā)射波長=535nm)。通過計算RFU凋亡誘導組/RFU陰性對照組的比值來確定凋亡誘導組caspase-6的活化程度。

本品適用于培養(yǎng)細胞以及新鮮組織的caspase-6活性檢測。


產(chǎn)品包裝

編號

組分名稱

保存方法

貨號(規(guī)格)

MX3232-20T

MX3232-100T

MX3232-A

Lysis Buffer 裂解緩沖液

2-8℃

5ml

20ml

MX3232-B

2× Reaction Buffer 2×反應緩沖液

2-8℃

2ml

10ml

MX3232-C

Caspase-6 Substrate Caspase-6底物

-20避光

6μl

30μl

MX3232-D

0.1M DTT

-20避光

60μl

250μl


保存與運輸方法

保存:-20℃保存,1年有效。開盒后置Lysis Buffer和2× Reaction Buffer于2-8℃保存。Caspase-6 Substrate和0.1M DTT需要避光凍存。

運輸:冰袋運輸。


注意事項

1) Caspase-6 Substrate需避光保存和使用。

2) 某些凋亡誘導劑誘導的凋亡可能通過caspase-6非依賴的方式進行,此種情況使用本品檢測的caspase-6活性無明顯變化,則,需要考慮凋亡機制中的其他信號通路。

3) 起始細胞數(shù)量需達3~5×106個或新鮮組織量達50~100mg,以保證達到測定所需的100~200μg蛋白量。Caspase-6的活性與細胞裂解后的蛋白含量有關(guān),如測定的RFU值偏低,可通過適當延長反應時間來操作。但如果測定的RFU值依然不高,則要通過增加細胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。

4) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


使用方法

1需要的其他試劑和材料

儀器:低溫高速離心機、熒光酶標儀、微量移液器、玻璃勻漿器(組織樣本)

耗材:1.5ml微量離心管、白色或黑色(不透明、平底)的96孔酶標板

試劑:PBS、蛋白定量試劑(比如:Bradford法蛋白濃度測定試劑盒)、ddH2O


2試劑準備

2.1 Lysis Buffer(含DTT

于實驗前,按每50μl Lysis Buffer 加入0.5μl DTT的比例準備足量的裂解工作液,置于4℃或冰上待用。

2.2 Reaction Buffer(含DTT

于使用前,按每50μl 2×Reaction Buffer 加入0.5μl DTT的比例準備足量的反應工作液。

2.3 Caspase-6 Substrate工作液

將Caspase-6 Substrate從冰箱內(nèi)取出,置于室溫(或25℃水?。┦蛊涑浞秩诨?,低速離心使其沉至管底。于使用前,按照19.5μl 2×Reaction Buffer 加入0.5μl Caspase-6 Substrate的比例準備足量的Caspase-6 Substrate工作液。


3樣本準備

3.1 細胞裂解

a)用合適方法誘導細胞凋亡,同時設(shè)立陰性對照組(不加誘導劑),收集3~5×106個細胞。

b)PBS洗滌細胞2次(2000rpm,離心5min),盡量吸盡PBS上清。

c)往離心的沉淀細胞中加入100μl預冷的Lysis Buffer(含DTT,吹打混勻。

d)置冰上裂解20~60min,其間渦旋振蕩3~4次,每次10s;或凍融2~3次。

e)4℃,10,000rpm離心1min。

f)小心吸取上清(含裂解釋放的蛋白質(zhì))轉(zhuǎn)移到新的EP管內(nèi),置于冰上待用。

g)取少量上清(1~2μl),用常規(guī)方法(Bradford法)測定蛋白濃度。

3.2 組織裂解

a)取50~100mg組織置于培養(yǎng)皿內(nèi),用手術(shù)剪剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入150~200μl預冷的Lysis Buffer(含DTT,用玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作。

b)將組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5ml預冷的離心管,10,000rpm,4℃離心5min。

c)小心吸取上清(含裂解釋放的蛋白質(zhì))轉(zhuǎn)移到新的EP管內(nèi),置于冰上待用。

d)取少量上清(1~2μl),用常規(guī)方法(Bradford法)測定蛋白濃度。

4Caspase-6活性檢測

 

相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

MX3223-20T

Caspase-1活性檢測試劑盒(比色法)

20T

MX3224-20T

Caspase-2活性檢測試劑盒(比色法)

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20T

MX3226-20T

Caspase-4活性檢測試劑盒(比色法)

20T

MX3227-20T

Caspase-6活性檢測試劑盒(比色法)

20T

MX3228-20T

Caspase-8活性檢測試劑盒(比色法)

20T

MX3229-20T

Caspase-9活性檢測試劑盒(比色法)

20T

MX3230-20T

Caspase 2活性檢測試劑盒(熒光法)

20T

MX3231-20T

Caspase-3活性檢測試劑盒(熒光法)

20T

MX3232-20T

Caspase-6活性檢測試劑盒(熒光法)

20T

MX3233-20T

Caspase-8活性檢測試劑盒(熒光法)

20T

MX3234-20T

Caspase-9活性檢測試劑盒(熒光法)

20T

 


  Caspase-6活性檢測試劑盒細胞增殖 Caspase-6活性檢測試劑盒細胞增殖

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