細(xì)胞：SK-MEL-2細(xì)胞
中文名稱：人皮膚惡性黑色素瘤細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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地球上所有的生物都依賴核糖體來合成蛋白質(zhì)，對(duì)于這個(gè)龐大復(fù)雜的分子機(jī)器來說，在機(jī)體內(nèi)要經(jīng)過高度復(fù)雜和動(dòng)態(tài)的組裝過程才能形成，而且這種組裝-拆卸-再組裝的過程也是生物機(jī)體所必需的。
研究深入探索了與一種基因突變密切相關(guān)的神經(jīng)退行性病變過程，他們針對(duì)小鼠展開了研究，解析小鼠中樞刪減系統(tǒng)中神經(jīng)細(xì)胞死亡的過程。
研究發(fā)現(xiàn)一種用于重復(fù)回收核糖體的特殊蛋白的缺失，會(huì)導(dǎo)致蛋白合成停滯不前，引起小鼠中神經(jīng)細(xì)胞死亡。
進(jìn)一步探討這種缺失的蛋白是否會(huì)在另外不同的遺傳背景下引起同樣的問題。但這種蛋白的缺失只有在一種特定的遺傳背景下才能引起神經(jīng)細(xì)胞死亡，這表明核糖體相關(guān)的突變依賴于對(duì)其產(chǎn)生影響的另外一種基因。
經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn)，研究最終發(fā)現(xiàn)了這第二個(gè)基因，即存在于大腦中的特殊tRNAs中的GTPBP2——tRNAs的作用是幫助DNA翻譯成蛋白。這種tRNA基因的突變會(huì)引起核糖體停止在一個(gè)特殊的DNA序列上，減慢蛋白合成過程。
由于這項(xiàng)研究采用的遺傳背景是用于構(gòu)建其他人類疾病模型，因此采用這種小鼠模型的研究人員也要多加注意。
