SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料
1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)
(1) 制膠時(shí)加入SYBR Green II 核酸染料。冷卻膠至50℃左右,每100mL膠中加入3~5μL SYBR Green II 10,000× 儲(chǔ)液,以此比例類(lèi)推。
(2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
注意事項(xiàng): 此方法染色可以準(zhǔn)確確定核酸片段分子量,染料用量相對(duì)較少。1mL染料大約可以做300塊 100mL的膠。
由于SYBR Green II熱穩(wěn)定性較差,不能在熱的膠溶液中直接添加,需要等待溶液冷卻至50℃左右才能添加。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。
2.泡染法
(1) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
(2) 用pH 7.0~8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE 或TE),按照10000﹕1的比例稀釋SYBR Green II 10,000× 儲(chǔ)液,混勻,制成1× 染色液。
(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的1× 染色液浸沒(méi)凝膠。用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10~30分鐘,染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的1× 染色液輕輕地倒在膠板上,讓其均勻地覆蓋整個(gè)膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過(guò)硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
注:用泡染法染色時(shí),可以精確確定核酸片段分子量。但染料用量較多。
W751-100UL | SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料 | 100µl | 780 |
W751-500UL | SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料 | 500µl | 2950 |
W752-100UL | SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料 | 100µl | 550 |