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南京沃博生物科技有限公司

當(dāng)前位置:南京沃博生物科技有限公司>>生化試劑>>常用試劑>>LX1710Phalloidin-iFluor™ 633 Conjugate

Phalloidin-iFluor™ 633 Conjugate

參   考   價(jià): ¥ 2006

訂  貨  量: ≥1支

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào):LX1710

品       牌:南京沃博生物科技有限公司

廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:南京市

更新時(shí)間:2021-09-16 16:40:55瀏覽次數(shù):151

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分類 其他 級(jí)別 超純、高純
鬼筆環(huán)肽 的分子量小,很容易通過(guò)細(xì)胞,不需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和TRITON X-100處理。毒性較大,戴上手套操作。

有幾種方法都能用來(lái)染色組織細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)的肌動(dòng)蛋白絲(F-actin)染色,其中,固定步驟在獲得可信且具代表性的細(xì)胞F-actin分布情況中至關(guān)重要。固定步驟基于實(shí)驗(yàn)自身需求來(lái)選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優(yōu)秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。

產(chǎn)品信息


貨號(hào)

名稱

規(guī)格

價(jià)格/

LX1710

Phalloidin-iFluor™ 633 Conjugate鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 633

300T

2006.4

Warbio生物以1000×儲(chǔ)存液形式(溶于DMSO)提供,按照100µl/孔(96孔板),總共可做300T。

注意事項(xiàng):   

鬼筆環(huán)肽  的分子量小,很容易通過(guò)細(xì)胞,不需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和TRITON X-100處理。毒性較大,戴上手套操作。

有幾種方法都能用來(lái)染色組織細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)的肌動(dòng)蛋白絲(F-actin)染色,其中,固定步驟在獲得可信且具代表性的細(xì)胞F-actin分布情況中至關(guān)重要。固定步驟基于實(shí)驗(yàn)自身需求來(lái)選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優(yōu)秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。

一、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備

1.1 iFluor 633 Phalloidin(貨號(hào)LX1710)

1.2 1×PBS Buffer(pH 7.4), for Cell Culture(貨號(hào) SH30256.01)

1.3 固定液(溶于PBS的4%多聚甲醛,pH 7.0)

1.4 破膜液(溶于PBS的0.5% Triton X-100)

1.5 (可選)抗熒光淬滅劑

1.6 (可選)即用型PI染色液(貨號(hào) 4209)

1.7 (可選)BSA, Standard Grade(貨號(hào) J8660)

1.8 黑框/透明底的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板

二、染色工作液準(zhǔn)備

2.1 于實(shí)驗(yàn)前將低溫保存的iFluor 633Phalloidin置于室溫回溫至少20min,低速離心后才開(kāi)瓶。第一次使用請(qǐng)將本品按照單次用量進(jìn)行分裝,置于-20℃避光保存,一年穩(wěn)定。

2.2 本品以1000×DMSO儲(chǔ)存液形式提供。開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前,使用1×PBS Buffer(pH 7.4)將其稀釋到1×染色工作液(比如1µl儲(chǔ)存液加入1ml PBS Buffer),用槍吹勻即可。

【注①】:以96孔板為檢測(cè)體系,按照100µl/孔來(lái)計(jì)算,準(zhǔn)備足量的染色工作液;也可對(duì)細(xì)胞爬片進(jìn)行染色,但需調(diào)整染色工作液的用量,以能覆蓋住細(xì)胞為準(zhǔn)。

【注②】:最佳的工作濃度和孵育時(shí)間取決于特定的應(yīng)用。根據(jù)特定的細(xì)胞類型和/或細(xì)胞/組織對(duì)探針的通透性來(lái)調(diào)整合適的染色條件。

【注③】:可使用含1% BSA的PBS Buffer稀釋儲(chǔ)存液,能夠降低非特異背景染色,也能最小化鬼筆環(huán)肽粘附到管壁的可能性。

【注④】:染色工作液現(xiàn)配現(xiàn)用,室溫避光保存。

三、染色流程(以96孔板為例)

3.1 用黑框/透明底的96孔板進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),使其貼壁生長(zhǎng)達(dá)到70-80%的匯合度。

3.2 吸掉培養(yǎng)液,用37℃預(yù)熱的1×PBS Buffer(pH 7.4)清洗細(xì)胞2次。

3.3 用溶于PBS的4%多聚甲醛固定細(xì)胞,室溫固定10-30min?!咀⒁狻浚汗潭ㄟ^(guò)程中甲醇能破壞肌動(dòng)蛋白,因此,固定液中最好避免接觸任何甲醇。有固定液是無(wú)甲醇的甲醛。

3.4 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次,室溫下30s/次。

3.5 用破膜緩沖液透化細(xì)胞,室溫處理5min。

3.6 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次,室溫下30s/次。

3.7 取100μl現(xiàn)配的iFluor 633Phalloidin染色工作液到每個(gè)孔內(nèi),室溫避光孵育30-90min。

【注意】:若有需要,此時(shí)可加入即用型PI染色液或其他不同于iFluor 633熒光光譜的細(xì)胞核染色液。

3.8 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次,室溫下30s/次。

3.9 加抗熒光淬滅劑(如Fluoromount-GTM)到孔內(nèi)保護(hù)熒光。

3.10 熒光顯微鏡下觀察染色結(jié)果,選擇iFluor 633激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=634/649nm)。

相關(guān)產(chǎn)品:

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

價(jià)格/

LX4520

FITC-Phalloidin  FITC-鬼筆環(huán)肽

300T

2006.4

LX2226

FITC-Phalloidin  FITC-鬼筆環(huán)肽

1mg

5199

LX4530

Phalloidin-Tetramethylrhodamine Conjugate TRITC-鬼筆環(huán)肽

300T

2006.4

LX4540

鬼筆環(huán)肽-加州紅 Phalloidin-California Red Conjugate

300T

2006.4

LX3801

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 350 Phalloidin-iFluor™ 350 Conjugate

300T

2006.4

LX4801

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 405 Phalloidin-iFluor™ 405 Conjugate

300T

2006.4

LX6801

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 514  Phalloidin-iFluor™ 514 Conjugate

300T

2006.4

LX7801

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 532 Phalloidin-iFluor™ 532 Conjugate

300T

2006.4

LX8801

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 594  Phalloidin-iFluor™ 594 Conjugate

300T

2006.4

LX2711

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 647 Phalloidin-iFluor™ 647 Conjugate

300T

2006.4

LX3712

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 680  Phalloidin-iFluor™ 680 Conjugate

300T

4092

LX4713

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 700  Phalloidin-iFluor™ 700 Conjugate

300T

4092

LX5714

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 750  Phalloidin-iFluor™ 750 Conjugate

300T

4092

LX5715

鬼筆環(huán)肽-iFluor™ 790  Phalloidin-iFluor™ 790 Conjugate

300T

4092

LX8717

鬼筆環(huán)肽-AF350 AF350 Phalloidin

300T

4092

LX1610

鬼筆環(huán)肽-AF488 AF488 Phalloidin

300T

4092

LX2610

鬼筆環(huán)肽-AF594AF594 Phalloidin

300T

4092

LX0226

Amino-Phalloidin 氨基鬼筆環(huán)肽

1mg

6199

LX1801

iFluor 488 phalloidin iFluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

300T

1857

LX2801

iFluor 555 phalloidin iFluor 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(橘色)

300T

1857

LX2800

Phalloidin 鬼筆環(huán)肽

1MG

5299



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