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制作標準曲線, 以減去本底后的OD值為X軸,標準品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條最合適的方程。要想檢驗?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標準品的濃度作為未知數(shù),將對應(yīng)的OD值帶入該方程,計算出標準品的濃度,得到的結(jié)果應(yīng)該與實際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度的那條曲線。
以下是CurveExpert1.4的使用過程:
1. 將OD值和標準品濃度數(shù)據(jù)復(fù)制粘貼到表格中
2. 生成和選擇標準曲線
3. 通過曲線計算樣品濃度
輸入OD值,點擊“計算"按鈕,得到樣品的準確濃度。
或者得到相關(guān)方程,通過excel來計算濃度。
如果需要導(dǎo)出方程,可點擊“復(fù)制",粘貼至excel中。
4. 對于OD值落在標準曲線之外的情況
如果樣品的OD值超過標準曲線的值,在實驗前應(yīng)該先將樣品稀釋從而得到準確的濃度。樣品的最終度應(yīng)該是計算出的濃度乘以稀釋倍數(shù)。
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