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PCR反應(yīng)實驗問題解讀2025/3/31
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。PCR實驗過程中問題詳解:一、沒有ct值檢測...
影響蛋白質(zhì)鹽析的因素歸納2025/3/24
蛋白質(zhì)通過鹽析的辦法沉淀的原理是降低蛋白質(zhì)的溶解度,使蛋白質(zhì)凝聚而從溶液中析出。影響鹽析的有以下因素:1.蛋白質(zhì)濃度高濃度蛋白溶液可以節(jié)約鹽的用量,但許多蛋白質(zhì)的b和Ks常數(shù)十分接近,若蛋白濃度過高,...
蛋白質(zhì)定量分析實驗說明2025/3/17
蛋白質(zhì)的定量分析主要依靠蛋白質(zhì)本身的發(fā)色基團,或與其它顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生的紫外吸收來進行的。目前常用的蛋白質(zhì)的定量主要有紫外線吸收法、Bradford法及BCA法等。實驗原理:BCA(bicinchoni...
制作細胞劃痕實驗需要注意事項2025/3/11
傷口愈合試驗,也通常稱為“劃痕試驗”,是一種廣泛建立的研究體外集體細胞遷移的技術(shù)。細胞劃痕(WoundHealing)是一種操作簡單,經(jīng)濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。其實驗原理是,當(dāng)細...
細胞傳代技術(shù)操作步驟2025/3/3
細胞傳代技術(shù)操作步驟:1、紫外照射滅菌后,我們應(yīng)該穿好滅菌服,戴好滅菌手套和口罩。2、從培養(yǎng)箱取出細胞培養(yǎng)瓶(一般選擇處于對數(shù)期的細胞),用酒精噴壺在培養(yǎng)瓶表面噴灑75%酒精消毒,轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶到超凈臺。...
ELISA檢測方法優(yōu)缺點分述2025/2/26
ELISA檢測主要方法有直接法、間接法、雙抗體夾心法和競爭法。1、直接法(directELISA)將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。優(yōu)勢:...
類器官蛋白提取方法2025/2/24
類器官蛋白提取方法:一、試劑準(zhǔn)備(細胞漿、細胞核及細胞膜蛋白抽提試劑盒)1、準(zhǔn)備溶液1)室溫融解試劑盒中的各種溶液,溶解后除結(jié)構(gòu)蛋白提取液外,其他試劑立即置于冰上;2)結(jié)構(gòu)蛋白提取液溶解后,可放置于3...
細胞凍存實驗操作流程2025/2/20
實驗原理:隨著溫度降低,細胞內(nèi)的酶活性會逐漸降低,到-70℃左右,酶活性幾乎為0,代謝活動停止,可以實現(xiàn)長期保存。然而,隨著溫度降低,細胞內(nèi)外的水分也會“結(jié)冰"并形成冰晶,冰晶能導(dǎo)致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷...
酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)技術(shù)詳細介紹2025/2/17
酶聯(lián)免疫吸附測定(enzymelinkedimmunosorbentassay,簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結(jié)合進行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法...
抗體的主要功能作用有哪些?2025/2/10
抗體(antibody,Ab)是由效應(yīng)B細胞(效應(yīng)淋巴B細胞)分泌,機體用于抵御外來物質(zhì),如病毒,細菌等抗原,結(jié)構(gòu)呈“Y"字型的球狀蛋白質(zhì),僅僅存在于脊椎動物的血液和B淋巴細胞膜表面。凡是能夠跟抗體結(jié)...
原代細胞如何分離和培養(yǎng)?2025/2/5
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴(yán)格來說,從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞,絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān)),再加上取材,成本等因素,...
ELISA試驗手工洗滌介紹2025/1/20
洗滌在ELISA試驗過程中雖不是一個反應(yīng)步驟,但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA試驗就是靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反...
ELISA檢測過程陰性對照(品)簡述2025/1/13
陰性對照(品):1、陰性對照(品)的概念與要求:所謂陰性對照(品),應(yīng)當(dāng)是本項檢測試驗中采用與待撿物(樣品、人用試劑就是人的血清等)具有同源性和同質(zhì)性,又不含有待檢物質(zhì),并能客觀比較和鑒別處理因素(血...
聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)引物的作用歸納2025/1/6
PCR(聚合酶鏈反應(yīng))是一種常用的分子生物學(xué)技術(shù),可用于擴增DNA序列。在PCR反應(yīng)中,引物是起關(guān)鍵作用的短鏈DNA分子,它們會與待擴增DNA序列的兩端匹配,指示聚合酶在這些位置開始復(fù)制DNA。引物在...
影響ELISA試劑盒質(zhì)量因素小結(jié)2024/12/23
ELISA試劑盒變質(zhì)是ELISA實驗中比較常見的問題,下面小結(jié)影響ELISA試劑盒質(zhì)量事項。1、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量全一致,即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差...

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