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ELISA實(shí)驗(yàn)原理:
包被:抗原或者抗體能以物理性吸附于固相載體表面,原因是蛋白質(zhì)和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,吸附之后能保持抗原抗體反應(yīng)等免疫活性;
標(biāo)記:抗原或者抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫活性和酶的催化特點(diǎn);
顯色:酶結(jié)合物與相應(yīng)包被在固相載體的抗原或者抗體結(jié)合后,也被固定在固相載體上,加入酶的底物之后可出現(xiàn)顯色反應(yīng),根據(jù)反應(yīng)的顏色深淺可計(jì)算抗原或者抗體的相對(duì)含量。
然而, 不管是使用說(shuō)明書上還是口口相傳,都指出ELISA試劑盒加樣時(shí)要避免出現(xiàn)氣泡,但實(shí)際操作時(shí)還是經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)。那ELISA試劑盒加樣時(shí)避免出現(xiàn)氣泡有效三個(gè)方法:
1、加樣時(shí)盡量靠近孔底(不要接觸孔底),用力均勻,不要過(guò)快過(guò)猛.
2、封閉時(shí)一定要加滿孔.
3、洗滌時(shí)一定要加滿孔(重要),氣泡會(huì)浮上來(lái)驅(qū)除。手工洗板時(shí)一定要吸干水分并用力拍干。(內(nèi)容僅供參考,有問(wèn)題或遇到問(wèn)題請(qǐng)?jiān)诰€咨詢,我們會(huì)竭誠(chéng)為您服務(wù))
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