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PC12低分化+GFP大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞

參  考  價:3000
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號

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    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

1×106 3000元 15瓶可售

更新時間:2024-06-07 13:28:23瀏覽次數(shù):295次

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貨號 XG-X3724 生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 多角形 用途 僅供科研研究實驗
PC12低分化+GFP大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:NCI-H1395 細(xì)胞專用培養(yǎng)基NCI-H1395人肺腺癌細(xì)胞NCI-H1395人肺腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基NCI-H1417 [H1417]小細(xì)胞肺癌NCI-H1417 細(xì)胞專用培養(yǎng)基NCI-H1417[H1417]細(xì)胞NCI-H1435非小細(xì)胞肺癌NCI-H1435細(xì)胞

運輸和保存:

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

商品信息:

產(chǎn)品名稱

PC12低分化+GFP大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞

貨號

XG-X3724

種屬

大鼠

生長特性

貼壁生長

組織來源

腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤

細(xì)胞形態(tài)

多角形

 

細(xì)胞介紹

  該細(xì)胞系來自能移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤。這些細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)生長因子(NGF)受體。NGF可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)表型。這些細(xì)胞不合成腎上腺素。該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶GFP基因。

  細(xì)胞特性

  1)來源:腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤

  2)形態(tài):多角形,貼壁生長

  3)含量:>1x10^6  細(xì)胞數(shù)

  4)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

  5)  用途:僅供科研使用。

  細(xì)胞篩選:

  該細(xì)胞為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GFP的細(xì)胞,隨細(xì)胞傳代次數(shù)的增加,其GFP熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選。

  建議收到細(xì)胞后至少傳3代,凍存留種后再進(jìn)行篩選。

  初次進(jìn)行細(xì)胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的培養(yǎng)基維持培養(yǎng),若無細(xì)胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,以此類推,至藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細(xì)胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),至細(xì)胞密度約80%,可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進(jìn)行篩選。當(dāng)加入5ug/ml嘌呤霉素時細(xì)胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。

  運輸和保存:干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞:

1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

  細(xì)胞接收后的處理:

  1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

  2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

  3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

  4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。??收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。

  一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

  1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

  2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

  3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

  二.細(xì)胞處理:

  1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇::

  將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

  2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

  對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

  1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

  2. 加入0.25%(w / v)胰dan白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

  3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

  3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例;

  1. 細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×10^7個活細(xì)胞/ml.

  2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×10^7個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

  3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

  注意事項:

  1. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

  2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。

PC12低分化+GFP大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 

 

細(xì)胞接收后的處理:

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

PC12低分化+GFP大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 

公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠脂肪干細(xì)胞

EB病毒IgA(EBvIgA)ELISA試劑盒

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞

人蘋果suan脫氫mei1(MDH1)檢測試劑盒elisa

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠合成mei(NOS)試劑盒 ELISA

大鼠鞏膜上皮細(xì)胞

鄂木斯克出血熱病毒RT-PCR試劑盒

大鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞

副流感病毒通用RT-PCR試劑盒

大鼠結(jié)膜上皮細(xì)胞

普通變形桿菌PCR檢測試劑盒

大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞

李斯特菌通用PCR檢測試劑盒

大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞

戈氏放線菌PCR試劑盒

大鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞

PCR試劑盒使用手冊V1.0

大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞

無綠藻通用PCR試劑盒

大鼠牙周膜干細(xì)胞

副溶血性弧菌PCR試劑盒

大鼠牙髓干細(xì)胞

副溶血性弧菌PCR試劑盒

大鼠口腔黏膜上皮細(xì)胞

問號鉤端螺旋體PCR試劑盒

大鼠舌表皮細(xì)胞

PC12低分化+GFP大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞狂犬病病毒固定毒株PCR檢測試劑盒

大鼠鼓膜上皮干細(xì)胞

錨蛋白BELISA試劑盒

細(xì)胞處理:

1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

 


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