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上海西格生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>細(xì)胞系>>人細(xì)胞系>> HCC827+LUC人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記

HCC827+LUC人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記

參  考  價(jià):3000
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

1×106 3000元 15瓶可售

更新時(shí)間:2024-06-07 12:44:01瀏覽次數(shù):161次

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貨號(hào) XG-X3313 生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
HCC827+LUC人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記公司正在出售的產(chǎn)品:MDCK [NBL-2] (犬腎細(xì)胞)MDCK II犬腎細(xì)胞MDCK 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基MDCK(NBL-2)馬-達(dá)二氏犬腎細(xì)胞MDCKII細(xì)胞MDCK-I犬腎細(xì)胞MDCK狗腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞MDCK狗腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

運(yùn)輸和保存:

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

商品信息:

產(chǎn)品名稱

HCC827+LUC人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記

貨號(hào)

XG-X3313

種屬

生長(zhǎng)特性

貼壁生長(zhǎng)

組織來(lái)源

肺腺癌

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

 

細(xì)胞介紹

這株細(xì)胞建于1994年三月。這株肺腺癌在EGFR酪氨激酶區(qū)域有一個(gè)獲得性突變(E746-A750缺失)?;颊咴?5歲到26歲時(shí)每個(gè)月抽1包煙。在診斷前12年不再抽煙。該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因

細(xì)胞特性

1) 來(lái)源:肺腺癌

2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)

3) 含量:>1×10?  細(xì)胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

運(yùn)輸和保存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備

1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;2mM L-谷an酰胺;1mM丙酮酸鈉;雙抗1%。

注意事項(xiàng):該細(xì)胞貼壁較慢,建議復(fù)蘇、傳代后讓細(xì)胞貼壁48h 后再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二.細(xì)胞處理:

1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰dan白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

下面T25瓶為例;

1. 細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來(lái)決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過(guò)夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

HCC827+LUC人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 

 

細(xì)胞接收后的處理:

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

HCC827+LUC人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 

公司正在出售的產(chǎn)品:

人骨髓來(lái)源巨噬細(xì)胞

人麻疹病毒(MV)ELISA檢測(cè)試劑盒

R 1610 (倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)

人去乙?;?/span>meiSirtuin-1(SIRT1/SIR2L1)試劑盒ELISA

CV-1 [Part of the Wistar Special Collection] (非洲綠猴腎細(xì)胞)

大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)試劑盒 ELISA

VERO C1008 [Vero E6] (非洲綠猴腎細(xì)胞)

斯氏分枝桿菌PCR試劑盒

CHO/dhFr- [CHO-DXB11] (倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(二氫還原酶缺陷))

RT-PCR試劑盒

HIT-T15 (倉(cāng)鼠胰島β細(xì)胞)

純綠青霉PCR檢測(cè)試劑盒

 細(xì)胞系 >> 猴

豬等孢球蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒

DH82 (犬巨噬細(xì)胞/狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞)

副流感病毒4a型RT-PCR試劑盒

MDCK [NBL-2] (犬腎細(xì)胞)

土茯苓探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒

COS-7 (非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞)

線頸線蟲(chóng)PCR試劑盒

LLC-MK2 (恒河猴腎細(xì)胞)

蜂房蜜蜂球菌(歐洲蜂幼蟲(chóng)腐臭?。?/span>PCR試劑盒

RF/6A (猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞)

蜂房蜜蜂球菌(歐洲蜂幼蟲(chóng)腐臭?。?/span>PCR試劑盒

Vero (非洲綠猴腎細(xì)胞)

細(xì)小病毒B19PCR試劑盒

B95-8 (絨猴EB病毒轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞)

HCC827+LUC人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記豬腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒

MA-104 [MA 104; MA104] (非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞)

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29ELISA試劑盒

細(xì)胞處理:

1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

 


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