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貨號	XG-X3507	生長特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	用途	僅供科研研究實驗

運(yùn)輸和保存：

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

商品信息：

名稱產(chǎn)品	PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞	產(chǎn)品別稱	PLC-PRF-5; PLC PRF 5; PLC/PRF5; PLCPRF5; PLC-8024; PLC8024; PLC; Alexander cells; Alexander; Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5
種屬	人	生長特性	貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基	MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
貨號	XG-X3507	組織來源	肝癌；亞力山大細(xì)胞

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）生長培養(yǎng)基:

MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2-3次/周

背景描述 PLC/PRF/5細(xì)胞分泌乙肝病毒表面抗原(HBsAg)；PLC/PRF/5細(xì)胞原先被支原體污染，后用BM-cycline去除支原體。

組織來源肝癌；亞力山大細(xì)胞

細(xì)胞類型腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型肝膽癌細(xì)胞

生物安全等級 BSL-2 [Cells contain hepatitis B]

倍增時間 ~36-48 hours

基因表達(dá)情況 hepatitis virus B surface antigen (HBsAg)

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-8024 ECACC; 85061113

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞

公司正在出售的產(chǎn)品：

人微血管周細(xì)胞	人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)elisa試劑盒
人轉(zhuǎn)化生長因子B2	人沙眼衣原體抗體(CT)IgG ELISA檢測試劑盒
人成纖維細(xì)胞生長因子2	大鼠脫氫表雄酮硫suan酯(DHEA-S)ELISA檢測試劑盒
人成纖維細(xì)胞生長因子2	安氏網(wǎng)尾線蟲PCR試劑盒
人轉(zhuǎn)化生長因子B2	牛RT-PCR試劑盒
人腫瘤壞死因子alpha	新孢子蟲通用PCR檢測試劑盒
人腫瘤壞死因子alpha	組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒
人白細(xì)胞介10	肺炎病毒RT-PCR試劑盒
人白細(xì)胞介10	魏氏無綠藻PCR試劑盒
人骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體I型beta	辛德畢斯病毒PCR檢測試劑盒
人干擾γ（IFNγ）	反芻獸考德里氏體PCR檢測試劑盒
人干擾γ（IFNγ）	非洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒
人成纖維細(xì)胞生長因子17	小蛇菌屬通用PCR檢測試劑盒
人成纖維細(xì)胞生長因子17	PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞阿尼昂尼昂病毒PCR檢測試劑盒
人成纖維細(xì)胞生長因子17	前膠原C端肽meiELISA試劑盒

細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。