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貨號	XG-X3399	生長特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣，帶有長的偽足	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

運(yùn)輸和保存：

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

商品信息：

名稱產(chǎn)品	kyse30人食道癌細(xì)胞	產(chǎn)品別稱	KYSE 30; KYSE30; KYSE0030
種屬	人	生長特性	貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基	RPMI-1640＋Ham's F-12＋2mM L-Glutamine＋10% FBS＋1% P/S	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣，帶有長的偽足
貨號	XG-X3399	組織來源	食管鱗狀上皮

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）生長培養(yǎng)基:

RPMI-1640＋Ham's F-12＋2mM L-Glutamine＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:5

推薦換液頻率 2-3次/周

背景描述 Derived from well differentiated invasive esophageal squamous cell carcinoma resected from middle intra-thoracic esophagus of a 64-year-old Japanese man prior to treatment; cell line Established from tumor cells heterotransplanted into athymic mice; described in the literature to be heterotransplantable in athymic mice and to carry p53 mutation and amplification of cERB B, MYC and CYCLIN D1

年齡（性別）女性；64歲

組織來源食管鱗狀上皮

細(xì)胞類型腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型食管癌細(xì)胞

生物安全等級 BSL-1

倍增時(shí)間 ~20-30 hours

保藏機(jī)構(gòu) DSMZ; ACC-351 ECACC; 94072011 JCRB; JCRB0188

kyse30人食道癌細(xì)胞

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

kyse30人食道癌細(xì)胞

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)	人晶體蛋白α(Cryα)elisa試劑盒
K7M2WT (K7M2-wt)小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基	人絲氨suan蛋白meiHTRA1(HTRA1)ELISA檢測試劑盒
L Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞專用培養(yǎng)基	大鼠能a1A受體(ADRA1A) 試劑盒 ELISA
L Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞專用培養(yǎng)基	斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒
K7M2WT (K7M2-wt)小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基	炭疽芽孢桿菌PCR試劑盒
K7M2WT(K7M2-WT)-LUC小鼠骨肉瘤成骨熒光酶標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基	小鼠白血病病毒PCR檢測試劑盒
K7M2WT(K7M2-WT)-LUC小鼠骨肉瘤成骨熒光酶標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基	瓜納圖巴病毒PCR檢測試劑盒
LLC小鼠肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基	莪術(shù)探針法PCR鑒定試劑盒
LLC小鼠肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基	蝦源性成分PCR試劑盒
LLC+LUC小鼠肺癌熒光酶標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基	血吸蟲PCR檢測試劑盒
LLC+LUC小鼠肺癌熒光酶標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基	杜氏利什曼蟲(黑熱病病原蟲)PCR試劑盒
L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)小鼠淋巴瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基	對蝦黃頭病病毒(YHV)核suan檢測試劑盒
L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)小鼠淋巴瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基	旋毛蟲PCR檢測試劑盒
L929小鼠成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基	kyse30人食道癌細(xì)胞結(jié)核分枝桿菌PCR檢測試劑盒
L929小鼠成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基	妊娠特異性β1糖蛋白4ELISA試劑盒

細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。