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人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2020-10-19 10:23:34瀏覽次數(shù):164次

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人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞
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公司產(chǎn)品采用干冰運輸,經(jīng)過逐步的降溫,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暫時停止其生命活動,保存其活性,使您的實驗更生動,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

 產(chǎn)品名稱

 規(guī)格

 貨號

 人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞

 5×105

XG-X6403

       產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細(xì)胞懸浮生長。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

3-Pyridinemethanol二硫化碳中環(huán)己烷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ASNS antibody人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA試劑盒

3-Dimethylaminopropylamine醇中環(huán)己烷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ASPA antibody人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)ELISA試劑盒

3-Fluorobenzoyl chloride二硫化碳中環(huán)己酮溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ASPH antibody人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒

3-Glycidoxypropyltrimethoxysilane醇中正十一烷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- Asprosin antibody人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)ELISA試劑盒

Cyclohexanepropionic acid二硫化碳中正十一烷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ASPRV1 antibody人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒

3-(Cyclohexylamino)-2-hydroxy-1-propanesulfonic acid二硫化碳中正戊烷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ASRGL1 antibody人11(KLK 11)ELISA試劑盒

3-Cyclohexylamino-2-hydroxypropanesulfonic acid sodium salt酮中1,4-內(nèi)酯溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ASS1 antibody人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒

3-Hexylthiophene二硫化碳中7種飽和脂肪族酯類混合溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ASS1 antibody人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒

人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Human GPRC5A (G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體anti- PRAME antibody半乳凝素8(GAL8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CAPF (Cuticular Active Peptide Factor) ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體anti- PRAP1 antibody(TRY)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human FABP5 (Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal ) ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90A抗體anti- PRC1 antibody雙腎上腺皮質(zhì)激素(DCX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human VEGFR1/FLT1 (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白134抗體anti- PRC1 antibodyⅢ型膠原α1(COL3α1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human ET (Epitestosterone) ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白69抗體anti- PRCC antibody半乳凝素12(GAL12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human PKM2 (Pyruvate Kinase, Muscle) ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98抗體anti- PRCP antibody半乳凝素12(GAL12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human PDH E1 (Pyruvate Dehydrogenase E1) ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體anti- PRDM10 antibody半乳凝素6(GAL6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human PDHα (Pyruvate Dehydrogenase Alpha) ELISA Kit 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白51抗體anti- PRDM15 antibody半乳凝素1(GAL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

收到細(xì)胞如何處理?

1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。

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