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人結(jié)腸平滑肌細胞

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2020-10-19 10:25:59瀏覽次數(shù):174次

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       產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標(biāo)準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標(biāo)準。

      保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

產(chǎn)品名稱

 人結(jié)腸平滑肌細胞

 規(guī)格

 5×105

 貨號

 XG-X6384

 

操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

2-Amino-5-bromopyrimidine油基單分散球形顆粒標(biāo)準物質(zhì)anti- APOA4 antibody人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒

2-Amino-6-methylpyridine油基單分散球形顆粒標(biāo)準物質(zhì)anti- APOB antibody人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒

2-Aminoisonicotinic acid油基單分散球形顆粒標(biāo)準物質(zhì)anti- APOBEC2 antibody人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒

2-Aminopurine油基MTD顆粒標(biāo)準物質(zhì)anti- APOBEC3B antibody人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒

CysteaMine;Decarboxycysteine;2-AMinoethanethiol;2-AMinoethylMercaptan;β-MercaptoethylaMine;ThioethanolaMine;MercaMine; MEA油基MTD顆粒標(biāo)準物質(zhì)anti- APOBEC3C antibody人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒

2-Phenyl-1-propanol;2-Phenylpropyl alcohol;β-Hydroxyisopropylbenzene;β-Methylphenethyl alcohol;β-HydroxycuMene;Hydrotropic alcohol油基MTD顆粒標(biāo)準物質(zhì)anti- APOBEC3G antibody人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒

2-Phenylphenol油基MTD顆粒標(biāo)準物質(zhì)anti- APOBEC4 antibody人組織因子(TF)ELISA試劑盒

2-Benzoylbenzoic acid油基MTD顆粒標(biāo)準物質(zhì)anti- APOC4 antibody人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒

人結(jié)腸平滑肌細胞Human P-Cadherin (Cadherin, Placental) ELISA Kit鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體anti- Podocalyxin antibody白介素5(IL5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human P-GP (Permeability Glycoprotein) ELISA Kit酸化鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體anti- Podoplanin antibody白介素5(IL5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human SELP (P-Selectin) ELISA Kit 鈣腔蛋白anti- Podoplanin antibody白介素5(IL5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human RAPGEF1 (Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 1) ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框222抗體anti- PODXL2 antibody白介素5(IL5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human Rac-GAP1 (Rac-GTPase Activating Protein 1) ELISA Kit 二嘧啶酶相關(guān)蛋白1抗體anti- POF1B antibody白介素5(IL5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human RHOB (Ras Homolog Gene Family, Memmber B) ELISA Kit細胞凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體anti- POFUT1 antibody膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human RCOR3 (Rest Corepressor 3) ELISA Kit周期素B2抗體anti- POFUT2 antibody膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human RHOA (Ras Homolog Gene Family, Memmber A) ELISA Kit單克隆抗體anti- POGK antibody膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

培養(yǎng)步驟:

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

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