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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
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產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-10-19 10:26:26瀏覽次數(shù):163次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線人胃MatchPair™:胃壁細(xì)胞和胃腫瘤原代細(xì)胞
公司產(chǎn)品采用干冰運(yùn)輸,經(jīng)過逐步的降溫,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暫時停止其生命活動,保存其活性,使您的實(shí)驗(yàn)更生動,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×105 | XG-X6391 |
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細(xì)胞懸浮生長。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
DL-Pipecolinic acid二硫化碳中1.2.3-三苯溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ARH3 antibody人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒
5-Methoxysalicylic acid酮中異戊酸溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ARHGAP1 antibody人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒
Sodium 2-naphthol-7-sulfonate酮中正戊酸溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ARHGAP10 antibody人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒
2-Hydroxynicotinic acid酮中異酸溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ARHGAP15 antibody人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒
2-Hydroxyethylhydrazine酮中正酸溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ARHGAP21 antibody人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒
3-Methylpicolinonitrile乙醇中酸溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ARHGAP25 antibody人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒
2-Mercapto-5-methyl-1,3,4-thiadiazole乙醇中酸溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ARHGAP4 antibody人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒
2-Thiopheneboronic acid酮中酸溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- ARHGAP5 antibody人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Human α-GST (α-glutathione S-transferases) ELISA Kit鈣調(diào)神經(jīng)酸酶調(diào)節(jié)蛋白1抗體(唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1)anti- PP1A antibody轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TNPO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human α-SCA (α-sarcomeric Actin) ELISA KitCentaurin α1抗體anti- PP1G antibody巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP1α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human α Actin (Alpha-Actin) ELISA KitB淋巴細(xì)胞白血病/淋巴瘤11/鋅指蛋白856抗體anti- PP2A antibody巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP1α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human α-Glu (Alpha Glucosidase) ELISA Kit豬圓環(huán)?、蛐鸵職さ鞍卓贵wanti- PPA1 antibody尿皮質(zhì)素1(UCN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human αHBDH (α-Hydroxybutyrate Dehydrogenase) ELISA Kit血管加壓素激活鈣啟動受體蛋白1抗體anti- PPA2 antibody尿皮質(zhì)素1(UCN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human α-La (Alpha-Lactalbumin) ELISA Kit干細(xì)胞生長因子受體/細(xì)胞表面分化抗原抗體anti- PPAN antibody尿皮質(zhì)素1(UCN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human SNCα (Synuclein Alpha) ELISA Kit軸突相關(guān)粘附分子抗體anti- PPAPDC3 antibody尿皮質(zhì)素1(UCN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human PDGFRβ (Platelet Derived Growth Factor Receptor Beta) ELISA Kit鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體anti- PPAR gamma antibody巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
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