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人淋巴管組織提取物

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2020-10-25 17:32:05瀏覽次數(shù):207次

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公司產(chǎn)品采用干冰運輸,經(jīng)過逐步的降溫,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暫時停止其生命活動,保存其活性,使您的實驗更生動,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

 產(chǎn)品名稱

 規(guī)格

 貨號

 人淋巴管組織提取物

 詳見說明書

XG-X6983

人淋巴管組織提取物【Human Lymphatic: Normal Lymphatic Vessel Derivatives】
淋巴管由毛細(xì)淋巴管匯合而成。其形態(tài)結(jié)構(gòu)與靜脈相似,但管徑較細(xì),管壁較薄,瓣膜較多且發(fā)達(dá),外形呈串珠狀。淋巴管根據(jù)其位置分為淺、深二種。公司科技提供來自新鮮或冷凍人淋巴管組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人淋巴管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細(xì)胞懸浮生長。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

VANADIUM (III) OXIDE腺相關(guān)病5抗體anti- METTL1 antibody肌球蛋白輕鏈1(MYL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

TRIETHANOLAMINE BORATEAFP4a蛋白抗體anti- METTL11A antibody肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

TRIETHYLENE GLYCOL MONOMETHYL ETHERRho GTP酶激活蛋白32抗體anti- METTL3 antibody白血病抑制因子(LIF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

TRIETHYLOXONIUM HEXAFLUOROPHOSPHATE細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體anti- METTL4 antibodyL選擇素(SELL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

TRIETHYLAMMONIUM ACETATE脂肪甘油三酯脂酶抗體anti- METTL4 antibodyL選擇素(SELL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

TRIVINYLMETHYLSILANE雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長因子)抗體anti- METTL5 antibody單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Triisopropyl phosphite能量平衡相關(guān)蛋白抗體anti- METTL6 antibody單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

BEHENIC ACID METHYL ESTER禽腦脊髓炎病AEV抗體anti- METTL7B antibody單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

人淋巴管組織提取物Mus musculus, mouse酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體Human TERF1(Telomeric repeat-binding factor 1) ELISA Kit鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白1(SGLT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Mus musculus, mouse膜相關(guān)環(huán)指蛋白5抗體Human PRAME(Melanoma antigen preferentially expressed in tumors) ELISA Kit鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白2(SGLT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

dried苯酸肽水解酶抗體Human TET2(Methylcytosine dioxygenase TET2) ELISA Kit丸陰離子轉(zhuǎn)運蛋白1(TAT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ../蛋白激酶MARK4抗體Human TEX101(testis expressed 101) ELISA Kit再生胰島衍生蛋白1β(REG1β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Rattus norvegicus, rat基化樣蛋白11抗體(N端)Human EIF2AK2(Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase) ELISA KitAMPA離子能受體1(GRIA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..大腸癌腫瘤突變蛋白抗體Human SNX9(Sorting nexin-9) ELISA KitAMPA離子能受體2(GRIA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

frozen促進(jìn)調(diào)解蛋白家族2A抗體Human HDAC7(Histone deacetylase 7) ELISA KitAMPA離子能受體2(GRIA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Staphylococcus epidermidis (Winslow and Win ..黑色素瘤抑制活性蛋白2抗體Human TGFBR3(Transforming growth factor beta receptor 3) ELISA KitAMPA離子能受體3(GRIA3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

收到細(xì)胞如何處理?

1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。

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