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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):162次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線人卵巢組織提取物【Human Ovary : Normal Ovarian Derivatives】
卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官。卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。公司科技提供來自新鮮或冷凍人卵巢組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人卵巢組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。
產(chǎn)品名稱 | 人卵巢組織提取物 |
規(guī)格 | 詳見說明書 |
貨號(hào) | XG-X6985 |
培養(yǎng)步驟:
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項(xiàng):
1. 接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%*-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Decamethylcyclopentasiloxane酸化蛋白激酶B2抗體anti- MFN2 antibody神經(jīng)生長因子(NGF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
PERFLUORODECANOIC ACID酸化鐵蛋白Fe65抗體anti- MFSD10 antibody神經(jīng)生長因子(NGF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
ZINC 1,2,3,4,8,9,10,11,15,16,17,18,22,23,24,25-HEXADECAFLUORO-29H,31H-PHTHALOCYANINE發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體anti- MFSD2 antibody神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
HEXADECANEDIOIC ACID酸化發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體anti- MFSD7 antibody神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
HEXADECYLTRIMETHOXYSILANE蛋白激酶B3anti- MFSD8 antibody神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
HEPTADECAFLUORO-1-OCTANESULFONIC ACID LITHIUM SALT肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體anti- MGAT1 antibody神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
HEPTADECAFLUOROOCTANESULFONIC ACID粘附相關(guān)激酶抗體anti- MGAT2 antibody神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
PERFLUOROHEXANESULFONIC ACID POTASSIUM SALT酸化粘附相關(guān)激酶抗體anti- MGAT3 antibody神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人卵巢組織提取物Cryphonectria parasitica (Murrill) Barr, te ..生肌調(diào)節(jié)因子6抗體Human MUM1(PWWP domain-containing protein MUM1) ELISA Kit*酰胺腺嘌呤二核苷酸酸(NAADP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
frozen基化CpG結(jié)合蛋白抗體Human HAS2(Hyaluronan synthase 2) ELISA Kit銅離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β肽(ATP7β)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Hericium erinaceus (Bulliard : Fries) Perso ..GTP結(jié)合蛋白MAS1抗體Human TMEM173(Transmembrane protein 173) ELISA KitTNF受體關(guān)聯(lián)因子3(TRAF3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Aspergillus flavus Link*單克隆抗體Human EIF2AK3(Eukaryotic translation initiation factor 2-alpha kinase 3) ELISA KitTNF受體關(guān)聯(lián)因子5(TRAF5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Neurospora crassa Shear et Dodge小鼠抗大單克隆抗體Human PMCH(Pro-MCH) ELISA KitToll樣受體銜接分子1(TICAM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體Human PMCHL1(Putative pro-MCH-like protein 1) ELISA KitTANK結(jié)合激酶1(TBK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Homo sapiens, human三聚胺抗體Human MCHR1(Melanin-concentRating hormone receptor 1) ELISA KitV-Maf肌肉腱膜纖維肉瘤癌基因同源物(MAF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Platyamoeba thermophila水痘帶狀皰疹gE蛋白抗體Human TMLHE(Trimethyllysine dioxygenase, mitochondrial) ELISA KitV-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病癌基因同源物(KRAS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
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