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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>細(xì)胞系>>人細(xì)胞系>> 22RV1人前列腺癌細(xì)胞
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1×106 1500元 15瓶可售
更新時間:2024-05-30 11:01:47瀏覽次數(shù):82次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線貨號 | XG-X3213 | 生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
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細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 22RV1人前列腺癌細(xì)胞 |
細(xì)胞別稱 | 22RV1; 22Rv-1; 22rV1; CWR22-Rv1; CWR22R-V1; CWR22-R1; CWR22Rv1; CWR22R |
種屬來源 | 人 |
商品貨號 | XG-X3213 |
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
凍存條件
凍存液:90%FBS+10%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
注意事項 22RV1細(xì)胞復(fù)蘇時需要離心去除DMSO。凍存細(xì)胞復(fù)蘇最初階段,貼壁量少,成簇松散貼壁,但是最終細(xì)胞會變平并且擴散成很好的單層,這個過程需要4-5天時間。細(xì)胞生長緩慢,細(xì)胞只能生長到90%的匯合度。細(xì)胞凍存后復(fù)蘇成活率不高,推薦凍存液配比為90%FBS+10% DMSO,使用優(yōu)質(zhì)血清。
背景描述 22RV1是來自異種移植(在閹割引起前列腺癌衰退又在其父親的雄性激su信賴型CWR22嫁接后復(fù)發(fā)的小鼠中連續(xù)傳代)的人前列腺癌上皮細(xì)胞系;22RV1細(xì)胞系表達前列腺特異抗原。二羥基睪丸脂酮輕微刺激22RV1細(xì)胞生長,經(jīng)Western Blot檢測溶解產(chǎn)物與抗雄性激su受體抗體起免疫反應(yīng);EGF刺激22RV1細(xì)胞生長,但TGFβ-1不能抑制細(xì)胞生長;22RV1可在裸鼠中成瘤。
年齡(性別) 男
組織來源 前列腺
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 前列腺癌細(xì)胞
生物安全等級 2
倍增時間 ~40 hours
致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice.
受體表達情況 androgen receptor
保藏機構(gòu) ATCC; CRL-2505 BCRC; 60545 DSMZ; ACC-438
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
b、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
c、棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
d、待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
b、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
c、用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
d、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
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三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
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