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L Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

參  考  價:1500
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

1×106 1500元 15瓶可售

更新時間:2024-05-30 11:40:59瀏覽次數(shù):101次

聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線
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貨號 XG-X3653 生長特性 貼壁生長
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣 用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
L Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞小鼠小腸平滑肌細(xì)胞大鼠小腸平滑肌細(xì)胞兔羊膜間質(zhì)細(xì)胞人肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞兔角膜上皮細(xì)胞人肝動脈平滑肌細(xì)胞

運(yùn)輸和保存:

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

商品信息:

名稱產(chǎn)品

L Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

產(chǎn)品別稱


種屬

小鼠

生長特性

貼壁細(xì)胞

換液頻率

2-3次/周

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

貨號

XG-X3653

組織來源

組織:皮下結(jié)締組織;疏松結(jié)締組織及脂肪;品系:C3H/An

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

背景描述 L Wnt-3A細(xì)胞是由L-M(TK-)細(xì)胞用Wnt-3A表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選出的穩(wěn)轉(zhuǎn)株。Wnt-3A基因編碼一個有變異的信號功效分泌性糖蛋白,Wnt基因控制胚胎發(fā)過程中的許多模式形成和生長事件。L Wnt-3A細(xì)胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白,L Wnt-3A細(xì)胞是目前生產(chǎn)Wnt-3A條件培養(yǎng)基的來源。由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子,對于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)有必要用其來源細(xì)胞株作對照。

年齡(性別) 雄性,100日齡

組織來源 組織:皮下結(jié)締組織;疏松結(jié)締組織及脂肪;品系:C3H/An

細(xì)胞類型 自發(fā)永生化細(xì)胞

生物安全等級 1

基因表達(dá)情況 Wnt-3A

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2647

L Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

細(xì)胞接收后的處理:

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

L Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

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細(xì)胞處理:

1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。



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