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注意事項：
1.加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”，因此盡量采用水??；
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復合物脫離；
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應用液；如以OPD)為底物，則試劑盒提片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應板應水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果，酶標儀不應置于陽光或強光照射下，需先預熱15-30 min再進行測試。

規(guī)格參數(shù)：

產(chǎn)品名稱	檢測范圍	貨號
Apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD ELISA Kit		XGF6729

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需要而未提供的試劑和器材：
1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規(guī)格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6. 蒸餾水，容量瓶等
常見組成部分：
1）酶和底物：在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP。
2）抗體：在ELISA中應用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。
3）抗原：在ELISA中應用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有三類，即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。
4 人E選擇素(E-Selectin/CD62E)檢測試劑盒包被：將免疫活性物質(zhì)(抗原或抗體)結(jié)合于固相載體上的過程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等；常用的方法有吸附法、化學交聯(lián)法及親和素-間接包被法。
5）固相載體：固相載體是ELISA中用以分離結(jié)合標記物和游離標記物的主要手段，應與各種免疫活性物質(zhì)有良好的結(jié)合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。
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實驗室規(guī)則這些你知道嗎？
一、產(chǎn)品名稱溫浴時，1,3-二磷酸甘油酸試劑盒要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
二、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體三、要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
三、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。人1,3-二磷酸甘油酸檢測試劑盒加入1/1000的疊氮鈉后可保存。
四、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。
五、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
六底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
七、待檢樣品要澄清，否則會影響結(jié)果。
八、溫浴時間應遵守試劑盒規(guī)定。