磷酸化細(xì)胞核因子抗體產(chǎn)品應(yīng)用   
英文名稱   Anti-phospho-NFKB p65(Ser536)
中文名稱  磷酸化細(xì)胞核因子抗體
別    名  NF-κB p65(Phospho-Ser536); RELA(phospho S536); NFKBp65; NF-κBp65; p65 NF kappaB; p65 NFkB; NFKBp65; RELA; Transcription Factor p65; v rel avian reticuloendotheliosis viral oncogene homolog A (nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B cells 3 (p65)); V Rel Avian Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog A; v rel reticuloendotheliosis viral oncogene homolog A (avian); v-rel reticuloendotheliosis viral oncogene homolog A; p65NFKB; Avian reticuloendotheliosis viral (v rel) oncogene homolog A; MGC131774; NFKB 3; NFKB3; Nuclear Factor NF Kappa B p65 Subunit; Nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B cells 3; Nuclear Factor Of Kappa Light Polypeptide Gene Enhancer In B Cells.
濃    度   1mg/1ml
規(guī) 格  0.1ml/100μg
抗體來(lái)源  Rabbit
克隆類型  polyclonal
交叉反應(yīng)    Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse
產(chǎn)品類型      一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域    腫瘤 染色質(zhì)和核信號(hào) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量   predicted molecular weight: 61kDa
性    狀   Lyophilized or Liquid
免 疫 原  KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human NFKBp65 around the phosphorylation site of(Ser536)
亞    型  IgG
純化方法   affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液  0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
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抗體的定義：
抗體（antibody），（免疫球蛋白不僅僅只是抗體）是一種由漿細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞）分泌，被免疫系統(tǒng)用來(lái)鑒別與中和外來(lái)物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì)，僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中，及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面。抗體能識(shí)別特定外來(lái)物的一個(gè)*特征，該外來(lái)目標(biāo)被稱為抗原。
動(dòng)物抗體功能分類：
①豬抗體：豬瘟抗體，豬藍(lán)耳抗體，豬圓環(huán)病毒抗體，豬偽狂犬抗體，豬細(xì)小病毒抗體，豬口蹄疫抗體，豬流感抗體等。
②禽抗體:小鵝瘟抗體，鴨肝抗體抗體，鴨漿膜炎抗體，禽流感抗體，新城疫抗體等
③?？贵w：牛口蹄疫抗體，奶牛乳房炎抗體，牛流行熱抗體，牛病毒性腹瀉抗體，牛出血性敗血癥抗體等
④羊抗體：羊痘抗體，羊口蹄疫抗體，羊小反芻獸疫抗體，羊快疫抗體，羊腸毒血癥抗體，羊猝疽抗體，羊黑疫抗體等。
⑤犬抗體：犬狂犬病抗體、犬瘟熱抗體、犬副流感抗體、犬腺病毒抗體與犬細(xì)小病毒病抗體，狐貉水貂的偽狂犬抗體、細(xì)小病毒抗體、乙腦抗體等。 
抗體的制備過(guò)程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過(guò)0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。

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