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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>細(xì)胞系>>人細(xì)胞系>> K562人慢性骨髓性白血病細(xì)胞系
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1×106 1350元 15瓶可售
更新時(shí)間:2024-06-06 14:02:13瀏覽次數(shù):588次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線貨號(hào) | XG-X3386 | 生長(zhǎng)特性 | 懸浮生長(zhǎng) |
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細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
運(yùn)輸和保存:
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
商品信息:
名稱產(chǎn)品 | K562人慢性骨髓性白血病細(xì)胞系 | 產(chǎn)品別稱 | K562; K 562; GM05372 |
種屬 | 人 | 生長(zhǎng)特性 | 懸浮生長(zhǎng) |
培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10% FBS+PS | 細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 |
貨號(hào) | XG-X3386 | 組織來源 | 骨髓;慢性骨髓性白血病(CML) |
細(xì)胞別稱:K562; K 562; GM05372
年齡性別:女;53歲
背景簡(jiǎn)介:k562細(xì)胞是由Lozzio從一名53歲的慢性髓細(xì)胞性白血病急變期的女性患者的胸水中分離建立的。該細(xì)胞曾被認(rèn)為來源于粒系,處于高度未分化階段;Anderson等人作了細(xì)胞膜特性的研究后,認(rèn)為該細(xì)胞是紅白血病細(xì)胞系。該細(xì)胞是對(duì)自然殺傷細(xì)胞高度敏感的體外靶標(biāo),故而被廣泛應(yīng)用于這方面的研究。K562的原始細(xì)胞是一種具有多向分化潛能的造血系統(tǒng)的惡性腫瘤細(xì)胞,能自發(fā)分化為紅系、粒系和單核系的可辨識(shí)的祖細(xì)胞,該細(xì)胞表達(dá)CD7(25%)
生物安全等級(jí):1
細(xì)胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè):無
基因表達(dá)情況:
保藏機(jī)構(gòu):ATCC; CCL-243 BCRC; 60007 BCRJ; 0126 CCLV; CCLV-RIE 0439 DSMZ; ACC-10 ECACC; 89121407
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
倍增時(shí)間:~30-48 hours
STR鑒定位點(diǎn)Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:8;D16S539:11,12;D18S51:15,16;D19S433:14,14.2;D21S11:29,30,31;D2S1338:17;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:9,11;D8S1179:12;FGA:21,24;TH01:9.3;TPOX:8,9;vWA:16;
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
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細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
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