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酵母基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)

參  考  價:951.6
具體成交價以合同協(xié)議為準
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    其他品牌

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    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

50次 951.6元 15盒可售

更新時間:2024-05-21 11:10:29瀏覽次數(shù):102次

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貨號 XG-P2747 規(guī)格 50次
包裝 盒裝 用途 僅供科研研究實驗
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酵母基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)

酵母基因組DNA提取試劑盒(離心柱型) 

貨號

規(guī)格

分類

XG-P2747

50

核酸純化

保存條件:本試劑盒在室溫儲存12個月不影響使用效果。

產(chǎn)品介紹:

 該試劑盒采用DNA吸附柱和獨的溶液系統(tǒng),適合于從多種來源的酵母培養(yǎng)物中快速簡單地提取基因組DNA。酵母細胞經(jīng)lyticase處理去除細胞壁后,結合液/蛋白酶K迅速裂解細胞和滅活細胞內(nèi)核酸酶,然后基因組DNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,抑制物去除液和漂洗液將細胞代謝物,蛋白等雜質(zhì)去除,最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈基因組DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。純化的DNA產(chǎn)物可直接用于PCR、酶切和雜交等實驗。

菌體濃度檢測:可采用分光光度計或平板培養(yǎng)法檢測菌體量,一般對于釀酒酵母,OD600值為1.0時,相當于1-2×107 cells/ml。

產(chǎn)品特點:

1.重復性好:離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。

2.提取純度高,OD260/OD280典型的比值達1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot和各種酶切反應。 

3.簡單快捷,操作安全。

自備試劑:無水乙醇、Sorbitol buffer、β-巰基乙醇



酵母基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)



酵母基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)

一、模板DNA:PCR反應需要模板DNA,如從細胞、組織、血液中提取DNA等;

二、引物:PCR反應的兩個引物,分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;

三、dNTPs:PCR反應中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細胞分裂、DNA合成         等生物學過程,用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增;

四、Taq DNA聚合酶:PCR反應需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴增DNA鏈;

五、PCR buffer溶液:對PCR反應具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛,可增強PCR反應特異性,從而提高反應效率;

六、酶切體系:PCR擴增往往涉及到重組、構建和測序等等實驗步驟,常常需要進行酶切操作。

七、MARK:一種分子量標準,用來判別DNA片段大小的工具。

八、DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應產(chǎn)物;


酵母基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)



酵母基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)

①Oligo dT
選擇Oligo dT時,要求RNA必須有Poly A,所以真核生物的mRNA都適用。適合長鏈甚至全長mRNA的RT,對RNA樣品的質(zhì)量要求較高,不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。假如想探索新的mRNA進行RT反應,建議推薦使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比隨機引物和特異性引物的穩(wěn)定性要好。
②隨機引物
適合各種RNA的RT,尤其適合模板豐度很低的情況(比如某個gene表達量很低)。選擇隨機引物時,鏈cDNA合成反應中就是以所有的RNA為模板,然后進行PCR反應時設計引物進行特異性擴增。同時要注意隨機引物的量和總RNA量之間的關系,一般建議每5µg總RNA的隨機引物的用量為50ng,如果每5µg總RNA的隨機引物的用量超過250ng,可能會導致小片段產(chǎn)物(<500bp)的增加和長片段、全長產(chǎn)物的降低。
③特異性引物
基因特異性引物(GSP)是某個基因序列的一部分,與模板互補的引物。該引物需要結合目標RNA的已知序列進行設計。由于引物和RNA序列特異性結合,每個目標RNA都需要一套新的基因特異性引物。因此,當分析多種目標時,則需要適用更多的RNA樣本。而且不同引物退火溫度本來就不相同,所以一般不推薦使用。如需要使用特異性引物,建議對退火溫度進行優(yōu)化。

酵母基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)

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