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產(chǎn)品概述

Cell Meter 檢測試劑盒是一套用于檢測細胞活力的工具。 Cell Meter 比色法MTT細胞增殖檢測試劑盒使用MTT（3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四氮唑溴化物）定量活細胞的數(shù)量。水溶性MTT在代謝活性細胞中產(chǎn)生水不溶性紫色甲瓚。產(chǎn)生的甲瓚的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。在560 nm附近測得吸光度增加。與其他需要繁瑣的增溶步驟來溶解不溶于水的甲瓚產(chǎn)物的其他商業(yè)MTT測定法不同，Cell Meter 比色MTT細胞增殖試劑盒只需很少的人工操作。我們專有的配方去除了費時的增溶步驟。它是確定細胞增殖和細胞毒性測定中活細胞數(shù)量的強大的MTT試驗。檢測靈敏度比傳統(tǒng)的MTT分析高10倍。百螢生物為您提供優(yōu)質(zhì)的 Cell Meter 比色法MTT細胞增殖檢測試劑盒。

實驗方案

樣品分析方案

概述

在96孔板中制備細胞（100 µL /孔）
添加MTT工作溶液（140 µL /孔）
在37°C下孵育2-4小時
讀取560 nm處的吸光度

注：使用前，請在室溫下解凍所有試劑盒組分。

工作溶液制備：

通過將4 mL MTT試劑A（組分A）與10 mL MTT試劑B（組分B）（2：5，MTT試劑A：B的體積比）混合，制備所需的MTT工作溶液量，混勻。

注意：14 mL MTT工作溶液足以在96孔板上進行100次測試。實驗前準備足夠的MTT工作溶液，并及時使用。

操作步驟

1.在具有透明底的組織培養(yǎng)孔板中，培養(yǎng)1000至40,000個細胞/孔。
2.將測試化合物添加到細胞中，并在37°C，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育所需的時間（例如24、48或96小時）。3.對于空白孔（不含細胞的培養(yǎng)基），添加相同量的測試化合物。對于96孔板，建議的總體積為100 µL，對于384孔板，建議的總體積為25 µL。
注意：應(yīng)對每個細胞系進行單獨評估，以確定增殖或誘導細胞毒性的細胞密度。對于增殖測定，使用較少的細胞；對于細胞毒性測定，請使用更多的細胞作為開始。
4.向每個孔中加入140 µL /孔（96孔板）或35 µL /孔（384孔板）。
5.在37°C下孵育平板2-4小時，避光。
注意：根據(jù)不同的細胞類型和使用的細胞濃度，孵育時間可能從2小時到過夜。優(yōu)化每個實驗的孵育時間。
用吸光度板讀數(shù)器在OD = 562 nm處檢測吸光度。

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